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真菌检测的质量控制



录入时间:2012-1-11 16:41:47 来源:互联网

低免疫人群的增长、超广谱抗生素的广泛应用使真菌感染迅速增加,侵袭性念珠菌及曲霉感染使重症监护病房(ICU)的病死率明显上升,50-75%的病例不能在生前获得细菌学的阳性结果,因此加强真菌检测的规范化操作,提高检测阳性率及药敏试验的正确率十分必要。

(一) 真菌涂片的规范化 

真菌涂片是真菌鉴定最重要的方法,真菌检验人员应熟悉真菌的形态特点;无菌体液标本涂片应离心浓缩以增加阳性率,并一定要检测菌丝;对痰及口腔标本要进行定量(菌落计数)或半定量(用加号表示,在分区划线的3个区都丰富生长报告为+++、依次类推2个区生长为++、1个区生长为+);组织标本涂片要研磨后涂片但要保护菌丝体的形态;在标本量许可的前题下涂片不应少于3张。

(二) 真菌鉴定的规范化

对酵母样真菌如念珠菌或隐球菌在常规临床细菌室已有较成熟的方法学,可用显色培养基或自动化系统鉴定真菌;常规鉴定丝状真菌主要依赖于其生长过程中形态变化和特点,所以要求从事丝状真菌检测的检验人员应作专业短期培训;任何实验室都应建立规范的涂片鉴定方法,要正确区分酵母样真菌或丝状真菌、毛霉菌和曲霉(有顶囊),对不常见的真菌不要轻易作为污染菌报告,

(三) 真菌药敏的质量保证

建立稀释法药敏试验,报告MIC值的报告对临床更有参考价值;必须正确掌握终点判断标准,氟康唑、伊曲康唑、氟胞嘧定等药物终点允许有20%真菌生长而两性霉素B应无真菌生长作为终点;对无折点的抗真菌药物药敏试验报告可只报告MIC,不能报告敏感度。鉴定真菌到种水平是临床用药的重要的参考。

(四) 要重视组织标本的培养

首先要无菌采集组织标本,接种前要无菌作适当粉碎将组织内的菌丝体暴露。每一份组织标本必须同时做涂片和培养。

(五)开展非培养方法的真菌检查试验,如-D葡聚糖和或诊断曲霉菌的GM试验,用于区别真菌、曲霉菌或细菌感染。

 

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