HAV虽可在培养细胞中增殖，但由于不引起明显的细胞病变，难判定病毒是否增殖，故实验室诊断一般不依靠分离病毒，而是以血清学检查为主。
血清学检查 检测抗HAV常用RIA和ELISA法。检测抗HAV IgM可做为HAV早期感染的指标，有助于早期诊断；检测抗HAV IgG有助于流行病学调查；检查粪便中抗HAV IgA也有助于诊断。
病毒及其抗原检测 在潜伏末期和急性期早期，可以采取咽拭子或粪便上清液接种于敏感细胞进行分离培养和鉴定，也可采用免疫电镜检测粪便中的HAV颗粒进行诊断；用放射免疫(RIA)或酶联免疫(EIA)法检测培养细胞或粪便中HAV的抗原。病毒核酸检测 应用cDNA-RNA核酸杂交技术及RT-PCR技术检测标本中HAV的RNA，方法特异、敏感。
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