致泻性大肠埃希氏菌——快速酶触反应

    致泻性大肠埃希氏菌能使人类致病，监诊表现主要为严重腹泻，多数表现为败血症。根据血清型别、毒力和所致临床症状可分为产肠毒素性大肠埃希氏菌（ETEC）、肠致病性大肠埃希氏菌（EPEC）、肠侵袭性大肠埃希氏菌（EIEC）、肠出血性大肠埃希氏菌（EHEC）以及肠粘附性大肠埃希氏菌（EAEC）五类。

    快速酶触反应：

    大肠埃希氏菌具β-葡萄糖醛酸酶，但以O157：H7为代表的肠出血性大肠埃希氏菌（EHEC）却不具此酶。

    毒素及毒力因子检测：包括LT、ST、Hly、SLT、Stx、EaeA、VT、EAST等，过去多用动物或细胞培养测定，现可用其单抗以多种免疫学手段检出，也可用基因探针技术或PCR等分子生物学技术检测。同时检测Hly和SLT基因，能快速检测和鉴定EHEC菌株，并与EPEC区分开来。

    基因探针和PCR技术：国内徐建烟根据溶血素hlyAB基因序列设计了鉴定EHEC的特异DNA探针，敏感性特异性达99%。Fortin将套式PCR技术和荧光探针技术相结合来检测O157，该方法不仅可以鉴定与O157抗血清有交叉反应的菌株，而且灵敏度高，可检测牛奶和苹果汁中102CFU/ml，的细菌，如果先进行6h增菌，可检测1CFU/ml的细菌。
基因芯片：Chizhikov将6个编码大肠杆菌细菌抗原和毒力的特异基因探针（EaeA，SltI，SltII，FliC，RfbE，IpaH）点样在玻片上，取多重PCR扩增产物与之杂交，用于同时检测和鉴定食物中毒相关的肠道病原体，该芯片可同时检测15种沙门菌、志贺菌和大肠杆菌的毒力因子。

    细胞粘附试验：传统的细胞粘附试验是检测EIEC的标准方法。方法为在24孔板的孔中圆形玻片上培养的HEP-2细胞单层，生长致50%；待检菌以L肉汤培养，37℃，静止培养16h；每孔加入20ul菌液（含2×107个菌），置37℃，5%CO2温育3h，培养液中含1%α-甲基-D-甘露醇；Hank’s平衡盐溶液洗培养板3次；70%乙醇固定，10%Giema染色，取出圆形玻片，置载玻片上，油镜观察。

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