苹果的花粉培养

苹果的花粉培养

（一）选取小孢子处于单核期的花蕾枝条。小孢子单核期的花芽外部形态特征是：花芽已充分开放，有4～5片叶完全展开，中心花蕾吐红，周围花蕾明显增大，但花序尚未分离。

（二）把花蕾插入水中，放在1～3℃的冰箱上预处理。

（三）摘取花蕾，在70％的酒精浸约半分钟，再在10％漂白粉上清液中浸15～20min，无菌水冲洗3～5次。

（四）胚状体的诱导。从花蕾中取出花药，接种到MS＋0．4mg∕L2，4－D＋0．2 mg∕L KIN＋4 mg∕L IAA＋3～8％蔗糖的固体培养基上培养，每瓶30～50个花药。在25～30℃下培养70d后，由变褐的花药裂口处开始产生胚状体。

（五）无根苗的诱导。　把产生胚状体的花药接种到MS＋0．5 mg∕L IBA＋0．1 mg∕L GA3＋1 mg∕L BA＋3～5％蔗糖的固体培养基上培养，在25～30℃和光照10h下，约经40～100d以上，胚状体可形成次生胚状体或丛生芽，进而发育成无根苗。

（六）根系的诱导。切取无根苗，转接到1∕2MS＋1．5 mg∕L IAA＋15～2％蔗糖的固体培养基上培养。约经15～20d，小苗茎基部长出根，形成完整植株。也可用50～100 mg∕L IBA溶液浸泡苗梢基部15～30 min，再插入无生长素的培养基上，也能较顺利地诱导生根。

（七）花粉植株的移栽。在春、秋季盆栽，保持15～20℃和高空气湿度，一般可使成活率达到40％以上。

（八）对有些不易生根和提早开花的植株，可用嫁接法进行繁殖。

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