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苹果的茎尖培养


录入时间:2012-2-29 16:18:35 来源:互联网

苹果的茎尖培养

(一)从健壮母株上,选取带芽或茎尖的茎段,先用70~75%的酒精浸30~60s,再用10%的次氯酸钠溶液浸泡10~15 min,或用0.1%升汞液浸5~7 min,最后用无菌水洗3~5次。

(二)剥取茎尖材料接种。为了培养无病毒苗,取的茎尖材料应小,一般为0.1~0.2㎜。为了加速无病毒材料的繁殖,或切取较大的茎尖,约0.3~0.5㎜大小,甚至带芽的较大茎段,如1~3㎜。茎尖的大小同培养的难易有关,大的分化率高,分化速度快。所以除了特殊的目的外,宁肯用较大的茎尖。

(三)把茎尖接种在MS或LS+2mg∕LBA+300~500mg∕L CH或LH+3%蔗糖的培养基上,诱导芽的分化。在25~30℃和光照下,先培养7~10d,见茎尖膨大转绿,再培养在黑暗中,可加快分化和绿化苗的生长。一般在暗培养中增殖2~3代。随后要转入光照下,以使苗生长健壮。光强以1500~2000Lx为宜。

(四)把伸长的芽接种到MS+0.5~1mg∕L? BA+300 mg∕L CH或改良的MS+4.4umolBA+0.5~49umolGA3的培养基上,这时苗会长大并产生丛生苗。每4~8周可分别繁殖一次,每个月约可增殖5~10倍。

(五)切取2㎝以上的带顶芽的苗切段,插入1∕2MS或其它低盐培养基(如White和Nitsh)中,附加1mg∕LIAA、0.2mg∕LIBA和3mg∕LGA3,可有效地促进生根。

    对生根困难的苹果砧木M9的试管苗生根,以先接种在含有2 mg∕L IBA、162 mg∕L 根皮酚的LS培养基上,培养4~7d后,转入无激素的LS培养基,生根快而频率高。

(六)苹果的试管苗也可以不进行生根,而直接嫁接到苹果矮化砧木上,既可保持树体有良好的矮化特性,又可通过采用无病毒繁殖材料妥善地解决无病毒繁殖问题。

(七)生根苗移出进行砂培2~3周,最后在土壤中培养,其成活率可达26.7~56.9%。

 

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