培养基的配制原则

  
（一）培养基组分应适合微生物的营养特点
即根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。 
         不同营养类型的微生物，其对营养物的需求差异很大。如自养型微生物的培养基完全可以（或应该）由简单的无机物质组成。异养做生物的培养基至少需要含有一种有机物质，但有机物的种类需适应所培养菌的特点。 
       按微生物的主要类群来说，它们所需要的培养基成分也不同： 
                        细菌：      牛肉膏蛋白胨培养基 
                                          LB  (Luria-Bertani) 
                        放线菌：   高氏一号培养基 
                        真菌：      查氏合成培养基 
                                          PDA (Potato-Dextrose-Agar) 
                            酵母菌；   麦芽汁 
当对试验菌营养需求特点不清楚的时候，可以采用‘生长谱’法进行测定。 
（二）营养物的浓度与比例应恰当
●浓度过高——微生物的生长起抑制作用， 
  浓度过小——不能满足微生物生长的需要。 
●碳氮比（C/N）直接影响微生物生长与繁殖及代谢物的形成与积累，故常作为考察培养基组成时的一个重要指标； 
C/N比值= 碳源中的碳原子的mol数/氮源中所含的氮原子的mol数 
例：谷氨酸生产中 
 C/N ＝4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少； 
C/N＝3/1 时，菌体生长受抑制，而谷氨酸大量增加。 
●速效性氮（或碳）源与迟效性氮（或碳）源的比例 
 ●各种金属离子间的比例 
（三）物理化学条件适宜
（1）pH:      各类微生物的最适生长pH值各不相同： 
                     细    菌：7.0~8.0    放线菌：7.5~8.5 
        酵母菌：3.8~6.0    霉    菌：4.0~5.8 
        在微生物的生长和代谢过程中，由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累，培养基的初始pH值会发生改变，为了维持培养基pH值的相对恒定，通常采用下列两种方式： 
内源调节：在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐；调节培养基的碳氮比。 
外源调节：按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液 
☆磷酸缓冲液：pH值从6.0~7.6之间 
☆加入CaCO3： 
☆培养基中所含氨基酸、肽、蛋白质等物质也可起到缓冲作用。 
（2）渗透压和aw
渗透压     
        等渗溶液    适宜微生物生长 
        高渗溶液    细胞发生质壁分离 
        低渗溶液    细胞吸水膨胀，直至破裂 
大多数微生物适合在等渗的环境下生长，而有的菌如Staphylococcus aureus则能在3mol/L  NaCl的高渗溶液中生长。能在高盐环境（2.8~6.2/L  NaCl）生长的微生物常被称为嗜盐微生物（Halophiles）。 
（3）氧化还原电势(redox poyential)
各种微生物对培养基的氧化还原电势的要求： 
好氧微生物：+0.3~+0.4V,(在>0.1V以上的环境中均能生长).厌氧微生物：只能在+0.1V以下生长 
兼性厌氧微生物：+0.1V以上呼吸、+0.1V以下发酵 

培养基是多氧化还原偶的复杂电化学系统，测出的Eh值仅代表其综合结果。 
对微生物影响最大的是：分子氧和分子氢的浓度 
培养基中常用的还原剂：巯基乙酸、抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等。 

 

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