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V-P试验


录入时间:2012-8-31 9:11:58 来源:海博生物

V-P试验简介  V-P试验,又名二乙酰试验

原理

  某些细菌能从葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇(Acetymethyl carbinol)→2,3-丁烯二醇(2,3-bytaylene cylycol),在有碱存在时氧化成二乙酰,后者和胨中的胍基化合物起作用,产生粉红色的化合物。

培养基

  含葡萄糖、K2HPO4、蛋白胨各5g,完全溶解于1000ml水中后,分装试管内,间歇灭菌或10磅10分钟灭菌。

方法

  1.O’Meara’s法
  试剂:40g氢氧化钾溶于100ml蒸馏水中,加入0.3g肌酐即成。
  用琼脂培养物将被检细菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养后,于35~37℃(哈夫尼亚菌则应在22~25℃)培养48-96小时,。于每毫升培养物中加入0.1ml,猛烈摇振混合。
  2.Baritt’s法
  试剂:6%α-奈酚酒精溶液为甲液,40%氢氧化钾为乙液。
  同上法接种培养细菌,于2ml培养液内加入甲液1ml和乙液0.4毫升,摇振混合。
  试验时强阳性者约于5分钟后,可产生粉红色反应,如无反应,应放在36±1℃下培养4h再进行观察。(长时间无反应,可置室温过夜),次日不变者为阴性。
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