FDA BAM菌落总数测定

            
一、菌落总数定义：
   菌落总数是指在被检样品的单位重量（g）、容积（ml）或表面积（cm2）内，所含能于某种固体培养基上，在一定条件下培养后所生成的菌落的总数。
二、FDA BAM 菌落总数测定流程：
    检样xg/mL+9xml稀释液（磷酸盐缓冲液）， 适当十倍稀释样品，选择2~3个连续适宜稀释度，各取1mL分别加入灭菌平皿内（每个稀释度做两个平行），每皿内加入适量平板计数琼脂（PCA），35 ℃ ，48 ± 2h，菌落计数 。
    选择25~250CFU之间的菌落进行计数，计算公式如下：
     N=∑C/（1*n1+0.1*n2）*d
所有平板的菌落数都不足25CFU，报告EAPC/ml（g）为＜25*1/d。
     EAPC：estimated aerobic plate count
所有平板的菌落数都超过250CFU，但不足100/cm2 ，报告EAPC/ml（g）为最接近250CFU的平板菌落数的估计值，乘以相应的稀释度。
所有平板的菌落数都超过100/cm2 ，计算平板的面积（直径为90mm的平板面积为65cm2），估计最高稀释度每cm2的菌落数，乘以相应平板面积作为该稀释度的菌落计数结果，报告EAPC/ml（g）为＞65*100* 1/d。
无法计数的平板报告LA（Laboratory Accident）。
最终结果保留前两位有效数字。按照4舍6入，5是奇进偶不进。

三、菌落总数测定几点要求
每个样品从开始稀释到倾注最后一个平皿所用的时间不得超过15min，主要为防止细菌增殖和产生片状菌落。样液与琼脂应充分混合，避免将混合物溅到平皿壁和皿盖上。皿内琼脂凝固后，不要长时间放置，然后倒置培养，可避免菌落蔓延生长。
检样过程中应用稀释剂做空白对照，用以判定稀释液、培养基、平皿或吸管可能存在的污染。同时，检样过程中应在工作台上打开一块空白平板计数琼脂，其暴露时间应与检样时间相当，以了解检样在检验操作过程中有无受到来自空气的污染。
检样稀释液有时带有食品颗粒，为避免与细菌菌落发生混淆，可作一检样稀释液与平板计数琼脂混合的平皿，不经培养，于4 ℃放置，以便在计数检样时用作对照。



   
   
   

 

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