酶联免疫技术(ELISA)的原理:结合在固相载体表面的抗原或抗体与待检样本特异性接合,酶标记的抗原或抗体催化底物发生颜色变化,颜色的深浅与待见样本量相关,从而获得待检样品的性质和数量。
在检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);酶标记的抗原或抗体(结合物);酶的底物;阴性对照品和阳性对照品(定性),参考标准品和控制血清(定量);酶联物(结合物)及样本的稀释液;洗涤液;酶反应终止液。
在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。用于检验的ELISA主要由以下几种类型:双抗体夹心法、间接法、竞争法、捕获法和应用亲和素和生物素的ELISA。微生物检测中,最常用的ELISA方法是双抗体夹心法和ELISA间接法。 |