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荚膜染色


录入时间:2013-6-20 9:10:16 来源:海博生物

某些细菌生长到一定阶段,在一定条件下会向细胞壁外分泌一层粘性的多糖类物质——荚膜。荚膜含水分多,疏松且较薄,受热易失水变形。荚膜不易染色,故常用衬托染色法,即将菌体着色,而将不着色的透明荚膜衬托出来。
染色器材
1.菌种:野油菜黄单胞菌(Xanthomona campestris)[或其他有荚膜的细菌]
2.染料:草酸铵结晶紫
3.器材:载玻片、接种棒、酒精灯、 擦镜纸、显微镜
染色步骤
1.涂片:在洁净无油腻的玻片中央放一小滴蒸馏水(或用接种环挑1-2滴水),用无菌的接种环挑取少量菌种与水滴充分混匀,涂成极薄的菌膜,涂布面积约1cm2  。
2.干燥:涂片在室温下使其自然干燥,也可以小心地在酒精灯上高处微微加热,使水分蒸发,但切勿紧靠火焰或加热时间过长,以防标本烤枯而变形。   
3.固定:手执玻片一端,有菌膜的一面朝上,通过微火三次(手指触摸反面不烫手为宜),待玻片冷却后,再加染色液。
4.染色:玻片置于玻片搁架上,加适量(以盖满菌膜为度)草酸铵结晶紫(或石炭酸复红染液)于菌膜部位,染色1-2min。
5.水洗:斜置载玻片,在自来水龙头(或洗瓶)下用小股水流冲洗,直至洗下的水呈无色为止。                          
6.干燥:自然干燥或用吸水纸吸去涂片上的水,用吸水纸时切勿将菌体擦掉。
7.镜检:用高倍镜和油镜观察并绘细菌形态并绘图于记录表中
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