卵磷脂酶试验

1、原理：某些微生物能产生卵磷脂酶，在钙离子存在时，能迅速分解卵磷脂，生成不溶性甘油酯和水溶性磷酸胆碱，在卵黄琼脂平板上菌落周围形成不透明的乳浊环或混浊白环，或使血清、卵黄液变混浊，以此鉴别细菌。 2、试验方法： （1）卵黄平板法  A法：将待检菌培养物划线接种或点种于卵黄琼脂平板上，36±1 ℃培养3～ 6h，观察结果。 B 法： 
先用卵黄磷脂酶抗血清将平板涂一半，置于36 ℃待干后，将待检菌接种于未涂抗血清的一半卵黄琼脂平板上，再转划已涂过抗血清的一半，36±1 ℃厌氧培养24～ 48h，观察结果。 
在未涂抗血清的一半平板上，菌落周围形成较大的不透明乳白色混浊区，在涂抗血清的一半平板上，菌落周围无不透明混浊区，为阳性。 两边均无不透明区，为阴性。 
乳糖卵黄琼脂平板,借以确定该菌可否产生卵磷脂酶。 卵磷脂酶具抗原性，其活性可被相应抗血清所抑制， （2）卵黄盐水法： 
 将庖肉培养基培养物经除菌过滤，收集滤液。在两支灭菌试管内，每管加入1%卵黄盐水0.4mL,在一管中加入滤液0.2mL，另一管加入生理盐水0.2mL作对照。在36 ℃ 水浴中，经2h、 4h、 8h、 24h观察结果。  管底发生混浊沉淀，对照管无沉淀者，为阳性。 3、结果观察与记录： 
 菌落周围形成较大的不透明区，为阳性。  两边均无不透明区，为阴性。 
 管底发生混浊沉淀，对照管无沉淀者，为阳性。  两管无沉淀者，为阴性。

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