李氏杆菌属的检测程序

---⑴ 增菌 
 目前常用的单核增生李斯特氏菌检测增菌肉汤主要有半量Fraser肉汤、 Fraser肉汤（FB）、UVM（Modified University of Vermont broth，也叫UVM1）、LEB（Listeria enrichment broth）和BLEB（buffered Listeria enrichment broth）  
半量Fraser肉汤和Fraser肉汤 • 具有选择性和区别性。 • 加入柠檬酸铁铵和七叶苷，起到区别的作用。李斯特氏菌可以水解七叶苷，与培养基中的铁离子反应，使培养基变黑，可直观的从培养液的颜色就可以判断是否有单核李斯特氏菌的生长。 
• 氯化锂、吖啶黄和萘啶酮酸作为选择性因子。 
• 半量Fraser肉汤与Fraser肉汤所用的添加剂一样 

• 
半量Fraser肉汤：萘啶酮酸10mg/L，吖啶黄12.5mg/L；Fraser肉汤：萘啶酮酸20mg/L，吖啶黄的25mg/L  UVM 
• UVM只有选择性没有区别性 
• 加入萘啶酮酸和盐酸吖啶黄，作为选择性因子。虽然其中含有七叶苷，但是没有添加柠檬酸铁铵，不能发生黑色的颜色反应。 LEB和BLEB 
• 只有选择性没有区别性 
• LEB是在TSB-YE的基础上加入盐酸吖啶黄、萘啶酮酸和放线菌酮等选择性因子；加入的丙酮酸钠，有助于受损细胞的恢复；不含七叶苷和柠檬酸铁铵，无颜色反应。 
• BLEB是在LEB基础上加入缓冲体系：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠 检测程序---⑵分离 
• 分离培养基有：OXA、PALCOM、LPM、MOX等，但首选仍然是OXA。分离原理主要是基于李斯特氏菌具有β－D－葡萄糖苷酶的活性，能水解培养基中的七叶苷，产生七叶素，与铁离子产生颜色反应而，使菌落为棕褐色，并带有褐色晕圈，而致病性和非致病性李斯特氏菌病都能发生这种反应 • 还有一些选择性显色培养基，如BCM、ALOA、CHROMagar listeria、Rapid’L. mono等，其原理主要是检测由毒力基因编码的溶血素，而此种溶血素只存在于单核增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌中，因而可以很好的将此两种菌同李斯特属的其他种分开。 检测程序---⑶鉴定 
蓝色菌落检验（Henry illumination） 典型运动：相差显微镜，轻微旋转或翻跟头 动力试验：7天，伞形生长 过氧化氢酶试验：阳性 革兰氏染色：阳性短杆菌 溶血试验：穿刺接种血平板 硝酸盐还原试验：5天，阴性 
糖发酵试验：葡萄糖、麦芽糖和七叶苷，李斯特菌属反应均为阳性，除格氏李斯特甘露醇阴性，李斯特其他种甘露醇阴性，木糖和鼠李糖最有检测意义。 目前单核细胞增生李斯特菌检验多采用国标法(GB/T4789.30)。 

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