半固体培养基中含有0,02%—0.3%的琼脂，这个琼脂量足以防止培养基的流动，从 而阻止氧分溶解到培养基中。
一种最适合的半固体培养基是在营养培养基(例如胰蛋白胨肉汤培养基或营养肉汤培养基〉中加人0.1%巯基乙酸钠和0.02%-0.3%的琼脂〖防止空气流动〗，然后再分装 到麦康凯瓶或试管中。加入0.0002%亚甲基蓝(每升培养基中含有0,2ml， 1%的亚甲基蓝水溶液)作为氧化还原电位指示剂。
加入营养肉汤中的这些物质，充分混匀，加热溶解后，每管12ml分装于150mm*16mm试管,用塞子塞紧，121℃卨压灭菌15min。亚甲基蓝作为氧化还原指示剂,氧化反 应使培养基呈蓝色，还原反应后培养基为无色。此培养基经储藏后，会变为蓝绿色，使用 前应沸水浴中加热10min，以除去氧气。
强化梭状芽孢杆菌培养基(RCM）
这种培养基是1954年研制的，虽然它不适合所有厌氧菌的生长，但对许多厌氧菌的计数还是有用的，例如食品样品中的厌氧菌。中含有葡萄糖 和半胱氨酸作为还原物质，将这种培养基分装到25ml带有螺帽的麦康凯瓶中，不需再用 石蜡或其他物质密封，就可提供厌氧菌的生长环境。在进行厌氧菌活细胞计数的检测中，建议使用只作为稀释液。
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