载玻片凝集试验

将细胞的抗原和单一的抗体混合后会发生凝集现象。抗原和抗体反应的结果是细菌细胞凝结成块，形成絮状物或密集的微粒。对于肠杆菌科细菌，如果是“H”型抗原（即鞭 毛抗原)和它的单一抗体发生的反应，形成絮状物；如抗原是“0”型抗原（即菌体抗原），则 形成更为密集的微粒凝块。

市售的抗体有两种类：能与特定菌属或几种血清发生反应的多价抗体,适用于做 初步的检测；特定的单克隆抗体，用于鉴别菌种特定的血清型。瓶装的抗体应置于4~7℃的暗处存放，在这种存放条件，它们的使用有效期要比标示的时间长几个月。但需 要定期地对抗体的实际效价(或浓度)进行测定。

13.2.1载玻片凝集试验

操作步骤

(1) 取一块干净、去油脂的载玻片，用蜡笔将其分成3部分，并分别标上“H”O’和 "C” (对照）;

(2) 在标有“C”的部分加上1〜2菌环生理盐水；

(3) 在标有“H”的部分加上】滴用甲醛处理过的细菌悬浮液(见下），在标有“0”的部 分加1滴经加热处理过的细菌悬浮液(见下）；

(4) 在标有“H”部分再加人1环没有稀释的多价“评’抗血清，使其与细菌悬浮液混合；

(5) 在标有“O”的部分再加入1环没有稀释的多价“0”抗血清，使其与细菌悬浮液 混合；

(6) 轻轻地前后晃动载玻片，在暗背景下观察3min，如发生凝集反应，通常在30S内 会有细菌凝块形成，对照部分不应有任何变化。

注意：每一次都必须先将接种环灼烧，冷却后再转移细菌悬浮液,这一操作步骤很 重要

对于可疑的沙门氏菌，推荐使用多价的沙门氏菌“O”抗体载玻片凝集试验验征。如 为阴性反应，用1~2组多价“H"抗体重复试验。如依旧为阴性反应，再用伤寒沙门氏菌 的“Vi”抗体重复试验。如需对发生凝集反应的菌种做进一步的鉴别，可使用 单一的血清因子。Harvey和Price(1961，1974)介绍过一个鉴别沙门氏菌H-抗原组的简 单方法，如果需要对一些特殊的血清进行鉴别可使用该方法。

上一篇：血清学试验概述

下一篇：乳胶凝集试验