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乳胶凝集试验



录入时间:2013-12-18 10:17:29 来源:海博生物

目前,市售的能吸附抗体的乳胶粒有多种(如直径小于lμm的聚苯乙烯珠),如果珠 子为白色,试验通常要在黑色背景下进行和观察。另一种更为复杂的试剂使用不只一种 颜色的乳胶粒悬浮液(例如红色、蓝色、绿色)。每一种颜色的乳胶粒与一种不同的抗体或 抗休的化合物结合。在白色背景下,观察凝集反应::以絮状物的颜色判定特定血清组是 否存在:代表性装置有Wellcoicx彩色试剂盒,它可以用来检测沙门氏菌和志贺氏菌(购自英国Dartford的Murex诊断所)。

一种类型的产品是免疫层析试剂盒。该装置提供一种一次性免洗的塑料浸染载玻 片,其中的带色微粒能与层析的流动相结合,观察窗中的固定相则含有抗体。加样后,若 在观察窗中看到彩色线条,则抗原-抗体呈阳性反应。这种浸染载玻片通常用来检测富养培养液中的目标微生物,因为该方法目前灵敏性较差,还不能直接用于检测一般食物样 品中低浓度的微生物。  

用于凝集试验的肠道菌死细胞的制备 操作步骤

(1) 分别将菌株转接到新制备的营养琼脂斜面和营养肉汤培养基中,37℃培养4~ 18h。分別检测“0”抗原和“H”抗原;

(2) ①“H”抗原的制备在5mL肉汤培养液中加人2— 3滴福尔马林,稀释为浑浊 液,微生物含量为5xlO8/mL;

②“0”抗原的制备用约3mL生理盐水洗F营养琼腊斜面菌种,收集细菌悬浮液, 在沸水浴中加1Omin,以破坏缺乏热稳定性的“H”抗原和“W”抗原。用于载玻片凝集 试验的悬浮液要很浓。

注意:以次氯酸盐或其他含氯化合物为原料制成的杀菌剂不能用于本实验废弃物的 灭菌,因甲醛会与之反应形成有毒的烟,很危险。

 

 


 

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