该技术使用的抗体与酶有共价的关联。选择使用那些经催化反应町以释放出发色团或荧光团的酶。传统的ELISA法使用有孔的微量滴定板，板上涂有用抗体处理过的吸附材料。这种已经免疫处理的抗体能捕获特殊的抗原。
在直接的ELISA技术中，抗原容易被诱捕，因此可以用它来检测食品稀释液或增菌肉汤中的目标微生物或目标毒素。将未结合的物质从孔中仔细洗掉，加入结合有酶的抗 体。这些结合物依次被抗原吸收。再次将末被吸收的物质洗掉后，添加酶作底物。由于 酶的活性而使发色团或荧光团释放颜色，颜色的强度弓抗原的数量成正比。该技术在方法学中被称为非竞争双抗体三明治技术。
根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法 ：双抗体夹心法；双抗体夹心法；间接法测抗体；竞争法；捕获法测IgM抗体；应用亲和素和生物素的ELISA；
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