刃天青试验步骤

刃天青的还原反应为两个阶段，首先不可逆的形成试卤灵，颜色由蓝色和紫色变为粉 红色，然后可逆地从试卤灵变为无色的二氢雷琐辛，可用Lovibond比色计（如从Merck获 得)进行试验比色。Merck给出了从0(无色)经1(粉红色)到6(蓝色）的一组颜色的变化 对照。

①制备刃天青溶液：将一片标准片剂（Mcrck)加人到50mL冷却的无菌蒸馏水中， 制成0,005%的刃天青标准溶液。溶液中的刃天青在光照下不稳定，因此不使用时，溶液 应保存在阴凉避光处,最好保存于冰箱，超过8h应弃掉。

②将待测样品彻底混合,然后加10mL奶于测试管中。

③加入lmL刃天青溶液,将吸管静置3s后，吹出剩余液滴，吸管不要接触奶或湿试 管壁。

④无菌橡皮塞塞住测试管，然后将测试管缓慢倒置2次(4s),将染色剂和奶混匀。

⑤将试管放入（37.5±0.5）℃水浴中记录试管放入时间。测定大量样品时，水浴中 的刃天青的测试管不应超过10个。lOmin排斥试验不应超过5个,水浴时应加 盖避光。

⑥培养时间取决于试验的特定要求，到规定时间时，取出并观察每个试管，完全还原的试管呈现白色，记录为0；呈现粉白色的试管或白色和粉色掺杂的，记录为1/2.将其他试管倒置，迅速用比色计比色如下：

在比色计的左边放置一个没有染色剂的混合奶空白试管，培养后的试管置于右边，比色计要有良好的自然光源或标准人造光源。将比色计放在工作台上，从两个空隙观察转动盘，直到与培养试管的颜色相同，记录转盘的次数，当颜色居于两个读数之间时，记为半值

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