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刃天青试验步骤



录入时间:2013-12-30 17:22:57 来源:海博生物

刃天青的还原反应为两个阶段,首先不可逆的形成试卤灵,颜色由蓝色和紫色变为粉 红色,然后可逆地从试卤灵变为无色的二氢雷琐辛,可用Lovibond比色计(如从Merck获 得)进行试验比色。Merck给出了从0(无色)经1(粉红色)到6(蓝色)的一组颜色的变化 对照。

①制备刃天青溶液:将一片标准片剂(Mcrck)加人到50mL冷却的无菌蒸馏水中, 制成0,005%的刃天青标准溶液。溶液中的刃天青在光照下不稳定,因此不使用时,溶液 应保存在阴凉避光处,最好保存于冰箱,超过8h应弃掉。

②将待测样品彻底混合,然后加10mL奶于测试管中。

③加入lmL刃天青溶液,将吸管静置3s后,吹出剩余液滴,吸管不要接触奶或湿试 管壁。

④无菌橡皮塞塞住测试管,然后将测试管缓慢倒置2次(4s),将染色剂和奶混匀。

⑤将试管放入(37.5±0.5)℃水浴中记录试管放入时间。测定大量样品时,水浴中 的刃天青的测试管不应超过10个。lOmin排斥试验不应超过5个,水浴时应加 盖避光。

⑥培养时间取决于试验的特定要求,到规定时间时,取出并观察每个试管,完全还原的试管呈现白色,记录为0;呈现粉白色的试管或白色和粉色掺杂的,记录为1/2.将其他试管倒置,迅速用比色计比色如下:

在比色计的左边放置一个没有染色剂的混合奶空白试管,培养后的试管置于右边,比色计要有良好的自然光源或标准人造光源。将比色计放在工作台上,从两个空隙观察转动盘,直到与培养试管的颜色相同,记录转盘的次数,当颜色居于两个读数之间时,记为半值

 


 

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