培养基和试剂的质量要求(GB4789.28-2013)

5培养基和试剂的质量要求

5.1基本要求

5.1.1培养基和试剂

培养基和试剂的质量由基础成分的质量、制备过程的控制、微生物污染的消除及包装和储存条件 等因素所决定。

供应商或制备者应确保培养基和试剂的理化特性满足相关标准的要求，以下特性的质量评估结果 应符合相应的规定：

—分装的量和（或）厚度；

—外观，色泽和均一性；

—琼脂凝胶的硬度；

—水分含量；

—20 ℃~25 ℃ 的 pH；

—缓冲能力；

—微生物污染。

培养基和试剂的各种成分、添加剂或选择剂应进行适当的质量评价。

5.1.2基础成分

国家标准中提到的培养基通常可以直接使用。但因其中一些培养基成分质量不稳定，可 允许对其用量进行适当的调整，如：

—根据营养需要改变蛋白胨、牛肉浸出物、酵母浸出物的用量；

—根据所需凝胶作用的效果改变琼脂的用量；

—根据缓冲要求决定缓冲物质用量；

—根据选择性要求决定胆盐、胆汁抽提物和脱氧胆酸盐、抗菌染料的用量；

—根据抗生素的效价决定其用量。

5.2微生物学要求

5.2.1 概论

培养基和试剂应达到附录D质量控制标准的要求，其性能测试方法按6.1执行。实验室使用商品 化培养基和试剂时，应保留生产商按3.1.1提供的资料，并制定验收程序，如需进行验证，可按6.2执 行，并应达到附录质量控制标准要求。

5.2.2微生物污染的控制

按批量的不同选择适量的培养基在适当条件下培养，测定其微生物污染。生产商应根据每种平板 或液体培养基的数量，规定或建立其污染限值，并记录培养基成分、制备要素和包装类型。

分别从初始和最终制备的培养基中抽取或制备至少一个（或1%)平板或试管，置于37℃培养18 h 或按特定标准中规定的温度时间进行培养本条款只适用于即用型培养基。

5.2.3生长特性

5.2.3. 1 一般要求

选择下列方法对每批成品培养基或试剂进行评价： —定量方法； —半定量方法； —定性方法。

采用定量方法时，应使用参考培养基进行对照；采用半定量和定性方法时，使用参 考培养基或能得到“阳性”结果的培养基进行对照有助于结果的解释。参考培养基应选择近期批次中 质量良好的培养基或是来自其他供应商的具有长期稳定性的批次培养基或即用型培养基。

5.2.3.2测试菌株

测试菌株是具有其代表种的稳定特性并能有效证明实验室特定培养基最佳性能的一套菌株。测试 菌株主要购置于标准菌种保藏中心，也可以是实验室自己分离的具有良好特性的菌株。实验室应检测 和记录标准储备菌株的特性；或选择具有典型特性的新菌株，使用时应引起注意；最好使用从食品或 水中分离的菌株。

对不含指示剂或选择剂的培养基，只需采用一株阳性菌株进行测试；对含有指示剂或选择剂的培 养基或试剂，应使用能证明其指示或选择作用的菌株进行试验；复合培养基（如需要加入添加成分的 培养基）需要以下列菌株进行验证：

—具典型反应特性的生长良好的阳性菌株；

—弱阳性菌株（对培养基中选择剂等试剂敏感性强的菌株）；

—不具有该特性的阴性菌株；

—部分或完全受抑制的菌株。

5.2.3.3 生长率

按规定用适当方法将适量测试菌株的工作培养物接种至固体、半固体和液体培养基中。 每种培养基上菌株的生长率应达到所规定的最低限值。

5.2.3.4选择性

为定量评估培养基的选择性，应按照规定以适当方法将适量测试菌株的工作培养物接种至选择性 培养基和参考培养基中，培养基的选择性应达到规定值

5.2.3.5生理生化特性（特异性）

确定培养基的菌落形态学、鉴别特性和选择性，或试剂的鉴别特性，以获得培养基或试剂的基本特性

5.2.3. 6性能评价和结果解释

若按照规定的所有测试菌株的性能测试达到标准，则该批培养基或试剂的性能测试结果符合规定。 若基本要求和微生物学要求均符合规定，则该批培养基或试剂可被接受。

上一篇：有关质控菌株的保藏及使用的要求（GB4789.28-2013）

下一篇：比浊法概述