非选择性培养基用于微生物菌落筛选和鉴定的方法

用非选择性培养基对牛乳、土壤、水和食品等含有混合微生物的样品进行计数时， 常需要估算平板上生长的不同种类的微生物的相对数量。然后就可以计算出存在于原 始样品中各种微生物的分布百分比。若不加控制地从培养皿中挑选菌落不能获得代表 性的菌落,现已有多种方法可获得真正隨机的菌落e在这些操作中，应该注意到那些可 能会被完全忽视但却十分重要的菌体组成。例如，在的假单胞菌中有10⁷的气单 胞菌,即在平均100个被检菌落中仅仅会发现一个气单胞菌菌落。特定的菌落的选择 方法取决于所需检测的菌落数目和存在于分离平板上的菌落数目。常用的选择方法 如下：

方法1

选择平板上的每一个菌落。这个方法获得的数量与被检菌落数目大致相等。

方法2

选择扇形区段和相对扇形区屮的每一个菌落。几种划分扇区的方法：

(1) 用油性记号笔在平板的表面划分扇区(如分四个区）。

(2) 将平板放在哈里逊(Harrison)板上，标记适当的扇区或菌落。哈里逊在研究奶酪 中的细菌数和细菌类型时(1938)设计了哈里逊板。它能够很方便地从少量供试的菌落中 获得有代表性的菌落。

将要检测的培养皿同心地放在板上。首先选择标记有“1”的区域中的所有菌落进行 检测。如果得不到足够的数目，选择标记有“2”的区域的所有菌落。如果有必要可以继续 选择“3”“4”区域中的菌落,直到达到所需的菌落数。一旦开始对标记了序号的扇区开始 计数，必须把这些扇区全部记完。所有在标记线上的菌落可忽略不记。

方法3:复制平板

如果平板表面巳接种，可以用复制工具转移所有的菌落。最简单的复制工具是无菌棉绒垫。它是在一个直径比平皿略小的合适的 圆柱体(如合金圆柱体)一端的平面上平放一张灭菌的棉绒垫(高压后快速臧少压力以保 证平绒蛰的干燥)而制成。将其轻轻压在培养基表面，压住菌落,取出后连续轻轻压在几 个准备好的灭菌的适当培养基上，最后压在对照培养基上检查转移是否成功。通常需要 转移9个平板加1个对照。釆用这种方法可以问时检测每一个菌落的多种生理特性。如 果要重新使用用过的平绒布，应将其放到一个装水的容器中。高ffi消毒，清除污染，再经 洗涤、漂洗、干燥、梳理后迸行高压灭菌。

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