副溶血性弧菌的血清学分型（GB4789.7-2013）

 制备

接种两管3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂试管斜面，36℃±1℃培养18 h〜24 h用含3%氯化钠的5% 甘油溶液冲洗3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂斜面培养物，获得浓厚的菌悬液。

K抗原的鉴定

取一管6.1制备好的菌悬液，首先用多价K抗血清进行检测，出现凝集反应时再用单个的抗血清进 行检测。用蜡笔在一张玻片上划出适当数量的间隔和一个对照间隔。在每个间隔内各滴加一滴菌悬液， 并对应加入一滴K抗血清。在对照间隔内加一滴3%氯化钠溶液。轻微倾斜玻片，使各成分相混合，再 前后倾动玻片1min。阳性凝集反应可以立即观察到。

O 抗原的鉴定

将另外一管的菌悬液转移到离心管内，121℃灭菌1 h灭菌后4 000 r/min离心15 min，弃去上层液 体，沉淀用生理盐水洗三次，每次4 000 r/min离心15 min，最后一次离心后留少许上层液体，混匀制成 菌悬液。用蜡笔将玻片划分成相等的间隔。在每个间隔内加入一滴菌悬液，将O群血清分别加一滴到间 隔内，最后一个间隔加一滴生理盐水作为自凝对照。轻微倾斜玻片，使各成分相混合，再前后倾动玻片 1 min。阳性凝集反应可以立即观察到。如果未见到与O群血清的凝集反应，将菌悬液121℃再次高压1 h后，重新检测如果仍为阴性，则培养物的O抗原属于未知。根据表1报告血清学分型结果。

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