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沙门氏菌常规检验方法的步骤



录入时间:2014-2-19 10:55:10 来源:海博生物

增菌培养

首先是增菌培养基的灵敏度。

关于食品中是否带有沙门氏菌,各个国家的标准基本上是一样的,即:25克无。

过去的理解是25克食品中不能检出沙门氏菌,但是没有提出要测定增菌液的灵敏度。

自从PCR试验技术推广应用以后,认为此项技术能够在·含有5~10个细菌的标本内获得阳性结果。才使我们理解到25克无是应该在25克食品中不能带有1个沙门氏菌。

前增菌

原国标4789.5-2003只对冻肉、乳品、蛋品等加工食品进行前增菌,FDA、AOAC、ISO、Canada MFHPB、CCFRA等组织或国家对所有样品都进行前增菌。

现国标改为对所有样品进行增菌

前增菌液:

FDA、AOAC:多种前增菌液可选择

乳糖肉汤(LB)or 胰酪胨大豆肉汤( TSB)or 煌绿溶液 (BG)or通用前增菌肉汤(UPB)or营养肉汤(NB)or 再造脱脂奶粉 or 四硫酸盐煌绿(TT)

ISO、国标:BPW 8-18h


选择性增菌培养

国际上常用的沙门氏菌增菌培养基有3种,即:(1)亚硒酸盐增菌液或亚硒酸盐胱氨酸增菌液,(2)四硫磺酸盐增菌液或四硫磺酸盐孔雀绿增菌液,(3)氯化镁孔雀绿增菌液(MM)(4)罗伯特增菌液(RVS)(5)亚硒酸煌绿增菌液(SBG)

现行的国家标准采用了(1)亚硒酸盐胱氨酸增菌液,和(2)四硫磺酸盐孔雀绿增菌液。

     AOAC:TTB、SC

     FDA:RVS、TTB

     ISO:RVS、SC

由于没有任何一种培养基可以不受食品本身的物理和化学因素的影响而可以兼顾各种沙门菌血清型所以较为适当的方法是使用两种增菌也进行平行增菌选择性增菌的目的是最大可能的检出沙门氏菌,原则上必须使用两种选择性分离增菌液,一种是抑制除沙门氏菌以外其肠道菌的生长(TTB,)一种是在不影响其他肠道菌生长的情况下促进沙门氏菌的生长(SC)。选择不同的增菌液和不同培养基的搭配,找到适合自己的方法可提高样品检出率

鉴别培养基

鉴别培养基的目的是将沙门氏菌分离出来。

  如果增菌液的灵敏度很好,在任何一种鉴别培养基上都会生长许多沙门氏菌的菌落。


 

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