大肠埃希氏菌初步生化与鉴定

初步生化试验

在CT-SMAC 和改良CHROMagar O157 显色琼脂平板上挑取5 个～10 个典

型或可疑菌落，分别接种TSI 琼脂，同时接种MUG-LST 肉汤，并用已知MUG阳性的大肠埃希氏菌株做对照，于36℃±1℃培养18h～24h。必要时进行氧化酶试验和革兰氏染色。在TSI 琼脂中，典型菌株为斜面与底层均呈黄色，产气或不产气，不产生硫化氢（H2S）。置MUG-LST 肉汤管于长波紫外灯下观察，MUG阳性的大肠埃希氏菌株应有荧光产生，大肠埃希氏O157:H7/NM 无荧光；对分解乳糖且无荧光的菌株，在营养琼脂平板上分纯，于36℃±1℃培养18h～24h，并进行下列鉴定。

鉴定

血清学试验

在营养琼脂平板上挑取分纯的菌落，用O157:H7 标准血清或O157 乳胶凝集试剂作玻片凝集试验。对于H7 因子血清不凝集者，应穿刺接种半固体琼脂，检查动力，经连续传代3 次，动力试验阴性，H7 因子血清凝集阴性者，确定为无动力株。

生化试验

用API20E 生化鉴定试剂盒或VITEK-GNI+检测卡，按照生产商提供的使用

说明进行。大肠埃希氏菌O157:H7/NM 生化反应特征见表。

生化试验 特征反应
三糖铁琼脂 底层及斜面呈黄色，H2S 阴性
山梨醇 阴性或迟缓发酵
靛基质 阳性
MR-VP MR 阳性，VP 阴性
氧化酶 阴性
西蒙氏柠檬酸盐 阴性
赖氨酸脱羧酶 阳性（紫色）
鸟氨酸脱羧酶 阳性（紫色）
纤维二糖发酵 阴性
棉子糖发酵 阳性
MUG 试验 阴性（无荧光）
动力试验 有动力或无动力

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