ONPG试剂缓冲液试验方法

缓冲液

成分

磷酸二氢钠（NaH2PO4˙H2O） 6.9 g

蒸馏水加至 50.0 mL

制法

将磷酸二氢钠溶于蒸馏水中，校正pH至7.0。缓冲液置2 ℃～5 ℃冰箱保存。

ONPG溶液

成分

邻硝基酚-β-D-半乳糖苷（ONPG） 0.08 g

蒸馏水 15.0 mL

缓冲液 5.0 mL

制法

将ONPG 在37 ℃的蒸馏水中溶解，加入缓冲液。ONPG 溶液置2 ℃～5 ℃冰箱保存。试验前，将所需用量的ONPG 溶液加热至37 ℃。

试验方法

将待检培养物接种3%氯化钠三糖铁琼脂， 36 ℃±1 ℃培养18 h。挑取1 满环新鲜培养物接种于0.25 mL 3%氯化钠溶液，在通风橱中，滴加1 滴甲苯，摇匀后置37 ℃水浴5 min。加0.25 mL ONPG 溶液，36 ℃±1 ℃培养观察24 h。阳性结果呈黄色。阴性结果则24 h 不变色。

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