大肠埃希氏菌分离与初步生化试验

分离

取增菌后的mEC+n 肉汤，划线或取0.1mL 涂布接种于改良山梨醇麦康凯（CT-SMAC）平板和改良CHROMagar O157 显色琼脂平板上，于36℃±1℃培养18h～24h，观察菌落形态。必要时将混合菌落分纯。在CT-SMAC 平板上，典型菌落为不发酵山梨醇的圆形、光滑、较小的无色菌落，中心呈现较暗的灰褐色；发酵山梨醇的菌落为红色。在改良CHROMagar O157 显色琼脂平板上为圆形、较小的菌落，中心呈淡紫色-紫红色，边缘无色或浅灰色。

初步生化试验

在CT-SMAC 和改良CHROMagar O157 显色琼脂平板上挑取5 个～10 个典型或可疑菌落，分别接种TSI 琼脂，同时接种MUG-LST 肉汤，并用已知MUG阳性的大肠埃希氏菌株做对照，于36℃±1℃培养18h～24h。必要时进行氧化酶试验和革兰氏染色。在TSI 琼脂中，典型菌株为斜面与底层均呈黄色，产气或不产气，不产生硫化氢（H2S）。置MUG-LST 肉汤管于长波紫外灯下观察，MUG阳性的大肠埃希氏菌株应有荧光产生，大肠埃希氏菌O157:H7/NM 无荧光；对分解乳糖且无荧光的菌株，在营养琼脂平板上分纯，于36℃±1℃培养18h～24h，并进行下列鉴定。

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