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大肠埃希氏菌分离与初步生化试验



录入时间:2014-3-7 11:15:01 来源:海博生物

 

分离

取增菌后的mEC+n 肉汤,划线或取0.1mL 涂布接种于改良山梨醇麦康凯(CT-SMAC)平板和改良CHROMagar O157 显色琼脂平板上,于36℃±1℃培养18h~24h,观察菌落形态。必要时将混合菌落分纯。在CT-SMAC 平板上,典型菌落为不发酵山梨醇的圆形、光滑、较小的无色菌落,中心呈现较暗的灰褐色;发酵山梨醇的菌落为红色。在改良CHROMagar O157 显色琼脂平板上为圆形、较小的菌落,中心呈淡紫色-紫红色,边缘无色或浅灰色。

初步生化试验

 

在CT-SMAC 和改良CHROMagar O157 显色琼脂平板上挑取5 个~10 个典型或可疑菌落,分别接种TSI 琼脂,同时接种MUG-LST 肉汤,并用已知MUG阳性的大肠埃希氏菌株做对照,于36℃±1℃培养18h~24h。必要时进行氧化酶试验和革兰氏染色。在TSI 琼脂中,典型菌株为斜面与底层均呈黄色,产气或不产气,不产生硫化氢(H2S)。置MUG-LST 肉汤管于长波紫外灯下观察,MUG阳性的大肠埃希氏菌株应有荧光产生,大肠埃希氏菌O157:H7/NM 无荧光;对分解乳糖且无荧光的菌株,在营养琼脂平板上分纯,于36℃±1℃培养18h~24h,并进行下列鉴定。

 

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