取供试液10ml（相当于供试品1g、1ml）2 份，其中1 份置80℃保温10 分钟后迅速冷却。上述2 份供试液直接或处理后分别接
种至100ml 的梭菌增菌培养基中，置厌氧条件下培养48 小时。取上述每一培养物0.2ml，分别涂抹接种于含庆大霉素的哥伦比亚琼脂培养基平板上，置厌氧条件下培养48～72 小时。若平板上无菌落生长，判供试品未检出梭菌；若平板上有菌落生长，应挑选2～3 个菌落分别进行革兰染色和过氧化氢酶试验。
过氧化氢酶试验 取上述平板上的菌落，置洁净玻片上，滴加3%过氧化氢试液，若菌落表面有气泡产生，为过氧化氢酶试验阳性，否则为阴性。
若上述可疑菌落为革兰阳性梭菌，有或无卵圆形或球形的芽孢，过氧化氢酶阴性，判供试品检出梭菌，否则判供试品未检出梭菌。
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