工作菌种的传代次数应严格控制，不得超过5代，（从菌种保藏中心获得的标准菌株为第0代）防止过度的传代造成菌种变异。1代是指将活的培养物接种到新鲜培养基中，任何亚培养的形式均被认为是转种或传代一次。必要时，实验室应对工作菌株的特性和纯度进行确认。
细菌的接种、分离和培养
接种、分离、培养是微生物学实验的基本
作技术，要求严格的无菌操作和在无菌环境下进行。
常用培养基种类
斜面接种
半固体培养基
液体培养基
平板培养基
接种方法
涂布法
划线法
穿刺法
直接加入法等
分离：
分段划线法、连续划线法、涂布分离法、倾注分离法等。
培养 ：接种后的培养基，根据不同微生物生长条件的要求，置培养基于适宜微生物生长的环境中，使其生长繁殖的过程。
需气培养法
厌氧培养法
培养后微生物的生长判断
固体培养基
液体培养基
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