阪崎肠杆菌（克罗诺杆菌属）定性检验

录入时间:2014-8-14 11:12:41 来源：海博生物

样品制备

取样前消毒样品包装的开启处和取样勺。无菌称取样品100g至2L的样品稀释瓶中，加人900mL预热到45 °C的灭菌蒸馏水，或者将样品直接称量到装有9倍预热到45 ℃的灭菌蒸馏水的样品稀释瓶中，振摇使样品充分混匀，36℃±1℃培养18 h〜22 h。

选择性増菌

移取培养18 h〜22 h的悬液1 mL加人10 mL克罗诺杆菌肉汤中，36℃±1℃培养18 h〜22 h。

初筛结果观察

将培养后的试管置于366 nm波长的UV灯下观察是否产生荧光，以空白样品作为对照。如果无荧光产生，阪崎肠杆菌（克罗诺杆菌属）为阴性；如果产生荧光，则以下列步骤进行操作。

可疑菌分离

轻轻混匀增菌液，每份增菌液用3 mm接种环（10μL）分别接种2个克罗诺杆菌显色平板，三区法或四区法划线，以得到单个菌落。将平板置36 ℃±1 ℃培养18 h〜22 h。

结果判别

观察平板上阪崎肠杆菌（克罗诺杆菌属）的典型形态。在克罗诺杆菌显色平板上为蓝绿色菌落，圆形，直径1 mm〜2 mm。

可疑菌产黄色素试验

从显色平板上挑取1〜5个可疑菌落分别接种到TSA平板上，25℃±1℃培养48 h〜72 h。

可疑菌生化鉴定实验

从TSA平板上挑取黄色菌落，革兰氏染色，做氧化酶试验。革兰氏染色阴性，氧化酶试验阴性，应用生化鉴定试剂或其他细菌鉴定系统进行鉴定。