微生物限度检查法——培养基及其制备方法

   
    11、十六烷三甲基溴化铵琼脂培养基
    胨                  10g     牛肉浸出粉 3g
    氯化钠               5g     琼脂  15～20g
    十六烷三甲基溴化铵 0.3g     水     1000ml
    除琼脂外，取上述成分混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.5±0.1，加入琼
脂，加热熔化后，分装，121℃灭菌20分钟，冷至约60℃，倾注平皿。
    12、亚碲酸盐肉汤培养基
    临用前，取灭菌的营养肉汤培养基，每100ml中加入新配制的1％亚碲酸钠（钾）溶
液0.2ml，混匀，即得。
    13、卵黄高盐琼脂培养基
    胨           6g           10％氯化钠卵黄液 100ml
    牛肉浸出粉 1.8g           琼脂               23g
    氯化钠      30g           水               650ml
    除10％氯化钠卵黄液外，取上述成分混合，微温使溶解,调节pH值使灭菌后为7.6±
0.1。121℃灭菌20分钟，待冷至约60℃，以无菌操作加入10％氯化钠卵黄液,充分摇匀,
倾注平皿。
    10％氯化钠卵黄液的制备  取新鲜鸡蛋一个，以无菌操作取出卵黄，放入10％灭菌
氯化钠溶液100ml中，充分振摇，即得。
    14、甘露醇高盐琼脂培养基
    胨        10g             1％酚红溶液  2.5ml
    牛肉浸出粉 1g             琼脂       15～20g
    甘露醇    10g             水          1000ml
    氯化钠    75g
    除甘露醇、1％酚红溶液及琼脂外,取上述成分混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌
后为7.4±0.2，加入琼脂，加热融化后，滤过，分装，115℃灭菌30分钟，冷至约60℃,
倾注平皿。
    15、蛋白胨水培养基
    胰蛋白胨  10g           水 1000ml
    氯化钠     5g
    取上述成分混合，加热融化，调节pH值使灭菌后为7.3±0.1，分装于小试管中,121
℃灭菌20分钟。
    16、磷酸盐葡萄糖胨水培养基
    胨                   7g       葡萄糖 5g
    磷酸氢二钾(K2HPO4) 3.8g       水 1000ml
    取上述成分混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.3±0.1，分装于小试管中，
121℃灭菌15分钟。
    17、枸橼酸盐培养基
    氯化钠                 5g       枸橼酸钠（无水）     2g
    硫酸镁(MgSO4·7H2O)  0.2g       溴麝香草酚蓝指示液 20ml
    磷酸氢二钾(K2HPO4)   0.8g       琼脂            15～20g
    磷酸二氢铵(NH4H2PO4)  1g        水               1000ml
    除溴麝香草酚蓝和琼脂外，取上述成分，混微温使溶解,调节pH值使灭菌后为6.9±
0.1，加入琼脂，加热融化，加入指示剂混匀。分装于小试管中，121℃灭菌15分钟，置
成斜面。
    注：所用琼脂应不含游离糖，用前用水浸泡冲洗。
    18、糖、醇发酵培养基
    基础液
    胨      10g           0.5％酸性复红指示剂 10ml
    糖、醇 0.5％          （或溴麝香草酚蓝指示液6ml ）
    氯化钠   5g           水                 1000ml
    取胨和氯化钠加入水中，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.4,加入指示剂混匀,
分装每瓶100ml，121℃灭菌15分钟。
    配制葡萄糖发酵管时，于100ml基础液中加入0.5g葡萄糖,分装于含杜氏管(Durham)
的小试管中。121℃灭菌15分钟,配制其它糖醇发酵管时,将各种糖醇分别配成10％溶液,
与基础液同时于121℃灭菌15分钟。以无菌操作将5ml糖醇溶液加入100ml基础液内,分装
于灭菌小试管中。
    注：糖醇溶液亦可采用薄膜过滤法除菌。
    19、5％乳糖发酵管
    胨                            0.2g    乳糖                    5g
    氯化钠                        0.3g    溴麝香草酚蓝指示液   0.6ml
    磷酸氢二钠(Na2·HPO4·12H2O)  0.2g    水                  1000ml
    除乳糖和指示剂外，取上述成分，混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.4,加
入乳糖及指示剂，混匀，分装于含杜氏管的灭菌小试管中，115℃灭菌15分钟。
    20、尿素琼脂培养基
    胨                 1g           葡萄糖          1g
    氯化钠             5g           20％尿素溶液 1000ml
    磷酸二氢钾(KH2PO4) 2g           琼脂           20g
    0.2％酚红溶液     6ml           水          1000ml
    除尿素和琼脂外，取上述成分，混合，调节pH值使灭菌后为7.2±0.1，加入琼脂，
加热溶化并分装于锥形瓶，121℃灭菌20分钟。冷至50～55℃,加入经薄膜过滤除菌的尿
素溶液，混匀。尿素的最终浓度为2％，分装于灭菌试管中，置成斜面。
    21、氰化钾培养基
    胨                     3g     磷酸氢二钠(Na2HPO4) 5.64g
    氯化钠                 5g     氰化钾试液
    磷酸二氢钾(KH2PO4) 0.225g     水                 1000ml
    除氰化钾试液外，取上述成分，混合,调节pH值使灭菌后为7.5±0.1，121℃灭菌20
分钟，冷却后，每100ml培养基中加入氰化钾试液1.5ml,分装于12×100mm灭菌试管内，
每管4ml，立即用灭菌橡皮塞塞紧，置4℃保存。同时，以不加氰化钾试液的培养基作为
对照培养基，分装于灭菌试管中。
    22、赖氨酸脱羧酶试验培养基
    胨         5g         1.6％溴甲酚紫乙醇溶液        1ml
    酵母浸出粉 3g         L-赖氨酸(DL-赖氨酸) 0.5(1g)/100ml
    葡萄糖     1g         水                         1000ml
    除赖氨酸外，取上述成分，混合，加热溶解后分装，每瓶100ml。加入L-赖氨酸0.5
g（DL-赖氨酸1g）调节pH值使灭菌后为6.8,同时以不加赖氨酸培养基作为对照。分装于
灭菌的小试管内，每管1ml并滴加一层液体石蜡，121℃灭菌10分钟。
    23、绿脓菌素(pyocyanin)测定用培养基（PDP琼脂）
    胨              20g       甘油       10ml
    氯化镁（无水） 1.4g       琼脂    18～20g
    硫酸钾（无水）  10g       水       1000ml
    取胨、氯化镁和硫酸钾加入水中，微温使深解。调节pH值使灭菌后为7.3±0.1，加
入甘油及琼脂，加热溶解，121℃灭菌20分钟，置成斜面。
    24、明胶培养基
    胨         5g         明胶 120g
    牛肉浸出粉 3g         水 1000ml
    取上述成分加入水中，浸泡约20分钟，随时搅拌，加热使溶解，调节pH值使灭菌后
为7.3±0.1，分装于小试管中，115℃灭菌20分钟。
    25、硝酸盐胨水培养基
    胨        10g           亚硝酸钠  0.5g
    酵母浸出粉 3g           水      1000ml
    硝酸钾     2g
    取胨及酵母浸出粉加入水中，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.3±0.1，加入硝
酸钾和亚硝酸钠溶解，混匀。分装于含杜氏管的小试管中，115℃灭菌20分钟。

 

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