微生物限度检查法——供试液的制备

   
   按供试品的理化特性与生物学特性可采取适宜的方法制成供试液。
    1 、液体供试品  取供试品10ml，加入90ml稀释剂中，混匀，作为供试液。油剂可
加适量吐温80；气雾剂以适宜方法使抛射剂导出后，加入适量稀释剂，混匀，吸取相当
10g或10ml供试品，再稀释成100ml作供试液；合剂（系指含王浆或蜂蜜者，下同）与滴
眼剂可用供试品作为供试液。
    2 、固体、半固体或粘稠液  供试品称取供试品10g,置0.9％无菌氯化钠溶液100ml
中，用匀浆仪或其它适宜方法，混匀后，作为供试液。在制备过程中，必要时可加适量
吐温80，并适当加温，但不应超过45℃。
    (1)非水溶性供试品  称取供试品10g(10ml)，加入灭菌吐温80  30ml、灭菌液体石
蜡10ml与0.9％无菌氯化钠溶60ml(或50ml)，同置匀浆仪中，乳化,或其它适发法乳化，
作供试液。在制过程中，必要时可适当加温，但不应超过45℃。
    (2)不溶于水的膜剂供试品  取规定量，剪碎，加稀释剂100ml（必要时可增加稀释
剂），浸泡，振摇，作为供试液。
    (3)肠溶胶囊（片）供试品  称取供试品10g，置含无菌磷酸盐缓冲液(pH6.8)100ml
的锥形瓶内。于45℃水浴中，保温、振摇、使溶解，作为供试液。
    3 含抑菌成分供试品  供试品如干扰控制菌检验，按以下方法处理后，依法检查。
    (1) 稀释法  将供试液种入较大量的培养基中，使该供试液稀释至不具抑菌作用的
浓度。
    (2) 离心沉淀集菌法  取规定量的供试液，离心(3000转)30分钟，弃去上清液，留
底部集菌液约2ml ，再稀释成原规定量的供试液。如有不溶性药渣，可先离心(500转)5
分钟，取全部上层液，再行集菌处理。
    (3) 薄膜过滤法  取规定量的供试液，置稀释剂100ml中,摇匀，以无菌操作加入装
有直径约50mm、孔径不大于0.45±0.02μm微孔滤膜的薄膜过滤器内，减压抽干后,用稀
释剂冲洗滤膜3次，每次50～100ml，取出滤膜备检。
    (4) 中和法  凡含磺胺、汞、砷类或防腐剂的供试品，可用相应的试剂钝化活性因
子，中和毒性后制成供试液。
    对照用菌液
    控制菌检查均应作相应已知菌的对照试验。对照菌株为大肠杆菌[CMCC(B)44102]、
沙门氏菌〔CMCC(B)50094〕、绿脓杆菌〔CMCC(B)10104〕及金黄色葡萄球菌〔CMCC(B) 
26003〕。
    取相应菌株的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物1白金耳,接种至营养肉汤培养基内，
培养18～20小时后，稀释至1:10<6>。 对照菌的加入量为50～100 个。

 

上一篇：微生物限度检查法—— 稀释剂

下一篇：微生物限度检查法——检查法