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空肠弯曲菌的鉴定-GB4789.9-2014


录入时间:2015-1-26 11:07:12 来源:食品安全国家标准

5.4 鉴定
5.4.1 弯曲菌属的鉴定
5.4.1.1 概述
挑取5个(如少于5个则全部挑取)或更多的可疑菌落接种到哥伦比亚血琼脂平板上,微需氧条件下42 ℃±1 ℃培养24 h~48 h,按照5.4.1.1~5.4.1.5进行鉴定,结果符合表1的可疑菌落确定为弯曲菌属。

  

1 弯曲菌属的鉴定项目

弯曲菌属特性

形态观察

革兰氏阴性,菌体弯曲如小逗点状,两菌体的末端相接时呈S形、螺旋状或海鸥展翅状a

动力观察

呈现螺旋状运动b

氧化酶试验

阳性

微需氧条件下25 ±1 生长试验

不生长

有氧条件下42 ±1 生长试验

不生长

a有些菌株的形态不典型。

b有些菌株的运动不明显。

5.4.1.2 形态观察
挑取可疑菌落进行革兰氏染色,镜检。
5.4.1.3 动力观察
挑取可疑菌落用1mL 布氏肉汤悬浮,用相差显微镜观察运动状态。
5.4.1.4 氧化酶试验
用铂/铱接种环或玻璃棒挑取可疑菌落至氧化酶试剂润湿的滤纸上,如果在10s内出现紫红色、紫罗兰或深蓝色为阳性。
5.4.1.5 微需氧条件下25 ℃±1 ℃生长试验
挑取可疑菌落,接种到哥伦比亚血琼脂平板上,微需氧条件下25 ℃±1 ℃培养44 h±4 h,观察细菌生长情况。
5.4.1.6 有氧条件下42 ℃±1 ℃生长试验
挑取可疑菌落,接种到哥伦比亚血琼脂平板上,有氧条件下42 ℃±1 ℃培养44 h±4 h,观察细菌生长情况。
5.4.2 空肠弯曲菌的鉴定
5.4.2.1 过氧化氢酶试验

挑取菌落,加到干净玻片上的3%过氧化氢溶液中,如果在30s内出现气泡则判定结果为阳性。
5.4.2.2 马尿酸钠水解试验
挑取菌落,加到盛有0.4 mL 1%马尿酸钠的试管中制成菌悬液。混合均匀后在36 ℃±1 ℃水浴中温育2 h或36 ℃±1 ℃培养箱中温育4 h。沿着试管壁缓缓加入0.2 mL茚三酮溶液,不要振荡,在36 ℃±1 ℃的水浴或培养箱中再温育10 min后判读结果。若出现深紫色则为阳性;若出现淡紫色或没有颜色变化则为阴性。
5.4.2.3 吲哚乙酸酯水解试验
挑取菌落至吲哚乙酸酯纸片上,再滴加一滴灭菌水。如果吲哚乙酸酯水解,则在5 min~10 min内出现深蓝色;若无颜色变化则表示没有发生水解。空肠弯曲菌的鉴定结果见表2。

 

2 空肠弯曲菌的鉴定特征

空肠弯曲菌

C. jejuni

结肠弯曲菌

C. coli

海鸥弯曲菌

C. lari

乌普萨拉弯曲菌

(C. upsaliensis)

过氧化氢酶试验

-或微弱

马尿酸盐水解试验

吲哚乙酸脂水解试验

注:+表示阳性;-表示阴性。

 

 

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