空肠弯曲菌的鉴定-GB4789.9-2014

5.4 鉴定
5.4.1 弯曲菌属的鉴定
5.4.1.1 概述
挑取5个（如少于5个则全部挑取）或更多的可疑菌落接种到哥伦比亚血琼脂平板上，微需氧条件下42 ℃±1 ℃培养24 h～48 h，按照5.4.1.1～5.4.1.5进行鉴定，结果符合表1的可疑菌落确定为弯曲菌属。

5.4.1.2 形态观察
挑取可疑菌落进行革兰氏染色，镜检。
5.4.1.3 动力观察
挑取可疑菌落用1mL 布氏肉汤悬浮，用相差显微镜观察运动状态。
5.4.1.4 氧化酶试验
用铂/铱接种环或玻璃棒挑取可疑菌落至氧化酶试剂润湿的滤纸上，如果在10s内出现紫红色、紫罗兰或深蓝色为阳性。
5.4.1.5 微需氧条件下25 ℃±1 ℃生长试验
挑取可疑菌落，接种到哥伦比亚血琼脂平板上，微需氧条件下25 ℃±1 ℃培养44 h±4 h，观察细菌生长情况。
5.4.1.6 有氧条件下42 ℃±1 ℃生长试验
挑取可疑菌落，接种到哥伦比亚血琼脂平板上，有氧条件下42 ℃±1 ℃培养44 h±4 h，观察细菌生长情况。
5.4.2 空肠弯曲菌的鉴定
5.4.2.1 过氧化氢酶试验

挑取菌落，加到干净玻片上的3%过氧化氢溶液中，如果在30s内出现气泡则判定结果为阳性。
5.4.2.2 马尿酸钠水解试验
挑取菌落，加到盛有0.4 mL 1%马尿酸钠的试管中制成菌悬液。混合均匀后在36 ℃±1 ℃水浴中温育2 h或36 ℃±1 ℃培养箱中温育4 h。沿着试管壁缓缓加入0.2 mL茚三酮溶液，不要振荡，在36 ℃±1 ℃的水浴或培养箱中再温育10 min后判读结果。若出现深紫色则为阳性；若出现淡紫色或没有颜色变化则为阴性。
5.4.2.3 吲哚乙酸酯水解试验
挑取菌落至吲哚乙酸酯纸片上，再滴加一滴灭菌水。如果吲哚乙酸酯水解，则在5 min～10 min内出现深蓝色；若无颜色变化则表示没有发生水解。空肠弯曲菌的鉴定结果见表2。

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