脓汁或喉拭子分离培养

【材料】

1．标本：脓汁或喉拭子。

2．培养基：血琼脂平扳、甘露醇发酵管、菊糖发酵管。

3．兔血浆、生理盐水、毛细滴管、吸管、小试管、试管架、革兰染液、玻片。

【方法】

1．将脓汁或喉拭子作涂片(注意先分离培养，后作涂片，避免污染)，革兰染色后镜检，观察细菌形态、排列及染色性。

2．将脓汁或喉拭子材料接种血琼脂平板，置37℃培养18~24 小时。

3．根据菌落特点及涂片检查结果，作出初步判断，必要时再作进一步鉴定。

（1）若菌落中等大小、完全溶血、不透明、产生金黄色色素、涂片革兰染色阳性，葡萄状排列，可能是金黄色葡萄球菌，可进一步做血浆凝固酶试验和甘露醇发酵试验，确定其致病力。

（2）若菌落较小、半透明、完全溶血、涂片革兰染色阳性 、大都呈链状排列，为乙型链球菌。

（3）若菌落较小、半透明、绿色不完全溶血环，涂片革兰染色阳性 、呈短链状排列，为甲型链球菌或肺炎链球菌，需要进一步鉴别，可作胆汁溶菌和菊糖发酵试验。学生通过判别做进一步的实验（甘露醇发酵和菊糖发酵试验）。将接种后的甘露醇发酵管和菊糖发酵管放入37℃孵箱。

附录：

血琼脂平板培养基：加热融化pH7.6 的肉汤琼脂培养基100 毫升，冷至45℃~50℃时，以无菌操作加入脱纤维的兔血或羊血5~10 毫升。摇匀后倾注平板，冷凝后即成。37℃孵誉24 小时，无菌生长，即可使用。血琼脂平板是营养培养基，因血液内含多种营养物质，可促进营养要求较高的细菌的生长。血琼脂平板也可用来检测细菌的溶血性。血液不耐热，故需待琼脂稍冷后才能加入。

上一篇：营养缺陷型突变菌株的筛选

下一篇：厌氧培养方法介绍