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脓汁或喉拭子分离培养



录入时间:2015-3-2 9:39:07 来源:青岛海博生物

 脓汁或喉拭子分离培养

【材料】

1.标本:脓汁或喉拭子。

2.培养基:血琼脂平扳、甘露醇发酵管、菊糖发酵管。

3.兔血浆、生理盐水、毛细滴管、吸管、小试管、试管架、革兰染液、玻片。

【方法】

1.将脓汁或喉拭子作涂片(注意先分离培养,后作涂片,避免污染),革兰染色后镜检,观察细菌形态、排列及染色性。

2.将脓汁或喉拭子材料接种血琼脂平板,置37℃培养18~24 小时。

3.根据菌落特点及涂片检查结果,作出初步判断,必要时再作进一步鉴定。

1)若菌落中等大小、完全溶血、不透明、产生金黄色色素、涂片革兰染色阳性,葡萄状排列,可能是金黄色葡萄球菌,可进一步做血浆凝固酶试验和甘露醇发酵试验,确定其致病力。

2)若菌落较小、半透明、完全溶血、涂片革兰染色阳性 、大都呈链状排列,为乙型链球菌。

3)若菌落较小、半透明、绿色不完全溶血环,涂片革兰染色阳性 、呈短链状排列,为甲型链球菌或肺炎链球菌,需要进一步鉴别,可作胆汁溶菌和菊糖发酵试验。学生通过判别做进一步的实验(甘露醇发酵和菊糖发酵试验)。将接种后的甘露醇发酵管和菊糖发酵管放入37℃孵箱。

附录:

血琼脂平板培养基:加热融化pH7.6 的肉汤琼脂培养基100 毫升,冷至45~50℃时,以无菌操作加入脱纤维的兔血或羊血5~10 毫升。摇匀后倾注平板,冷凝后即成。37℃孵誉24 小时,无菌生长,即可使用。血琼脂平板是营养培养基,因血液内含多种营养物质,可促进营养要求较高的细菌的生长。血琼脂平板也可用来检测细菌的溶血性。血液不耐热,故需待琼脂稍冷后才能加入。

 

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