厌氧培养方法介绍

 厌氧培养方法介绍

  常用的厌氧培养方法主要有二大类，包括化学厌氧培养方法和物理厌氧培养方法，他们分别通过化学和物理的方法来制造厌氧环境，从而有利于厌氧菌的生长繁殖。

（一）化学厌氧培养法

  常用为厌氧生物袋培养法：厌氧生物袋是一种特制不透气的塑料袋，袋中装有气体发生管、催化剂小管(内放钯粒)和氧化还原指示剂小管(美蓝)．接种好的平板放入袋中，排出袋中气体，卷叠好袋口，用弹簧夹荚紧，然后折断气体发生小管中安瓿，使发生反应产生CO2、H2 等，在催化剂钯的作用下，H2+O2(袋中剩余氧) H2O，这更保证了无氧环境，经0.5h 再折断指示剂管中美蓝液安瓿(美蓝在无氧环境中呈无色美白，在有氧环境中又可变成蓝色的美蓝)，如指示剂不变蓝，表示袋内已成无氧环境，此时即可放37℃孵育培养。厌氧产气管成份；碳酸氢钠、磞氢化钾、5％柠檬酸溶液。厌氧指示管成份：0.002％美蓝、10％碱性葡萄糖。催化反应管成份：钯(A 型)。

（二）物理厌氧培养方法

1、厌氧缸培养法

  厌氧缸是一个可密封的玻璃缸，顶端有一个抽气口，使用方法如下：A.将接种厌氧菌的平板立即放入厌氧缸。B.在厌氧缸内放入冷催化剂钯粒和美兰指示剂安瓿。C.用真空泵抽去缸中的空气，使缸内大气压降到10％毫米汞柱，然后充入氮气，反复三次。最后充入80％氮气，10％二氧化碳及10％氢气。D.密闭厌氧缸。此时，缸内99％的氧气已被氮气，二氧化碳及氢气置换，残余的氧气，在钯粒催化下与氢气作用生成水，缸壁会有水滴出现。缸内美兰指示剂由浅兰色转变为无色，表示缸内氧气已被驱除。E.放入37℃，培养48 小时后观察结果。

2、厌氧箱培养法

  为专门培养厌氧菌的培养箱，现多为全自动控制，当将培养物放入培养箱，关上封闭门后，其自动启动，通过多次抽掉空气，灌入氮气、二氧化碳及氢气，最后形成厌氧环境。培养48 小时后即可取出培养物，观察结果。

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