液体培养

1.好氧菌的培养由于大多数撖生物都是好氧菌，且微生物只能利用溶于水中的氧，所以，如何保证在培养液中有较髙的溶解氧浓度就显得特别重要。

在常压（20℃）达到平衡时，氧在水中的溶解度仅为6.2ml/L，这些氧只能保证氧化8.3mg葡萄糖，仅相当培养基中常用葡萄糖浓度的1%。除葡萄糖外，培养基中的无机或有机养料一般都可保证微生物使用几小时至几天，因此，对好氧菌来说，生长的限制因子几乎总是氧的供应，只有将培养液装成浅层时，氧才不至于成为限制因子，在进行液体培养时，一般可通过增加液体与氧的接触面积或提高氧分压来提高溶氧速率，具体措施有：①浅层液体培养；②利用往复式或旋转式摇对三角瓶培养物作振荡培养；③在深层液体培养器的底部通入加压空气，并用气体分布器使其以小气泡形式均匀喷出；④对培养液进行机械搅拌，并在培养器的壁上设置阻挡装置。

在实验室进行好氧细菌培养的具体方法有以下几类：

(1)试管液体培养装液量可多可少。此法的通气效果一般均不够理想，仅适合培养兼性厌氧菌。

（2）三角瓶浅层培养在静止状态下，三角瓶内的通气状况与其中装液量（表7-9〉和棉塞通气程度对微生物的生长速度和生长量有很大的关系。此法一般也仅适宜培养兼性厌氧菌。

〔3〕摇瓶培养即将三角瓶内培养液用3层纱布包住瓶口，以取代一般的棉花塞，同时降低瓶内的装液量，把它放到往复式或旋转式摇床上作有节奏的振荡，以达到摁高溶氧暈的目的，目前仍广泛地用于菌种的筛选以及进行生理、生化和发酵等试验中。

（4）台式发酵罐体积一般为几升至几十升，并有多种自动控制和记录装置。现成的商品种类很多，用作发酵研究十分方便。

2.厌氧菌的培养在实验室中，用液体培养基培养厌氧茵时，一般采用加有有机还原剂〔如巯基乙酸、半胱氨酸，维生素C或庖肉等）或无机还原剂（铁丝等）的深层液体培养基，并在其上封以凡士林石蜡层，以保证它们的氧化还原电位达到150mV-420 mV的范围。如果能将其放厌氧罐或厌氧箱中培养，则效果将会更好。

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