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李斯特菌的鉴定和验证


录入时间:2015-4-2 13:31:22 来源:青岛海博生物

1李斯特菌能水解七叶,除格氏李斯特菌外,其他李斯特均不能分解甘露醇产酸。在牛津琼脂平板上,李斯特菌菌落直径为23mm,带有黑褐色或黑色晕轮七叶苷水解所形成,菌落的中心经常是下凹的;在PALCAM琼脂,李斯特菌菌落直径为1.52mm,绿色并带有黑色的晕轮或菌落中心为黑色

2验证时,挑取5个典型的菌落,每个菌落划线接种到胰蛋白胨大豆酵母浸琼脂TSYEA上,置于3537需氧培养2448h,分离平板上的单个菌落以确保菌株的纯度。

3检查TSYEA平板上生长的单个菌落,使用亨利描述的菌落特征进行分离。亨利认为李斯特菌在TYS平板上生成细小的、半透明的菌落,菌落呈蓝色、蓝绿色或蓝灰色,菌落表面为细小的颗粒状,类似于粗糙的磨砂玻璃。

 TSYES平板上挑取一个单个的菌落,分别接种于胰蛋白胨大豆酵母浸膏肉汤
TSYEB试管和蛋白胨大豆酵母浸膏琼脂TSYEA斜面上,25培养1824h

4TSYEB肉汤培养物进行菌体运动试验和革兰氏染色。李斯特菌属呈翻筋斗运动,注意与振荡培养后非致病性李斯特菌的快速直线运动进行区别。李斯特菌为小的、革兰氏阳性的、无孢子的短杆菌。

TSYEB面上的生长物进行过氧化氢酶和氧化酶试验。李斯特菌过氧化氢酶试验阳性,氧化酶试验阴性。

TSYEB斜面上的培养物接种下列培养基,进行验证和鉴定试验:

a. 接种D-葡萄糖、D-水杨苷L-鼠李糖、D-木糖发酵肉汤(含有溴甲酚紫;见附
1,置3537培养7d每天检查产酸的情况(生化管由紫色变为黄色)

b. 接种硝酸盐蛋白胨水,检査硝酸盐的产生情况。在3537培养 5d

c. 使用金黄色葡萄球菌和马红球菌进行CAMP试验。在3537培养24h

 

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