沙门氏菌生化鉴定操作及反应理

   沙门氏菌是一群形态、培养、生化反应和抗原构造相类似的革兰氏阴性杆菌，种类繁多。已发现2000多个种（或血型）。它是革兰氏阴性杆菌，需氧或兼性厌氧，最适生长温度为35～37℃，最适pH值为6.8～7.8。不分解乳糖（亚利桑那菌除外）。分解葡萄糖产酸产气（伤寒沙门氏菌产酸不产气）。多数产生H2S，不产生靛基质，不液化明胶，不分解尿素，不产生乙酰甲基甲醇，多数能利用枸橼酸盐，能还原硝酸盐为亚硝酸盐，在氰化钾培养基上不生长。

三糖铁试验

实验步骤：将被检菌穿刺接种三糖铁琼脂，36±1℃培养18h～24h后，观察结果。

 沙门氏菌反应为：斜面产碱，底层产酸，产H2S。

反应原理：沙门氏菌不发酵乳糖，使斜面呈红色，发酵葡萄糖，而使底层呈黄色，且能分解培养基中的硫氨基酸，生成H2S，H2S遇铅或铁离子形成黑色的硫化铅或硫化铁沉淀物。

尿素酶试验

实验步骤：将被检菌接种到尿素酶肉汤中，于36±1℃培养18-24h，观察结果。变红色为阳性，不变色或者变黄色为阴性。

沙门氏菌为阴性。

反应原理：细菌能产生尿素酶，分解尿素形成氨，使培养基变碱，酚红指示剂随之变红色。

靛基质(吲哚)试验

实验步骤：将被检菌接种到蛋白胨水培养基中，36±1℃培养18h～24h后，沿试管壁滴加数滴吲哚试剂于培养物液面，观察结果。

沙门氏菌为阴性。

反应原理：细菌具有色氨酸酶，能分解培养基中的色氨酸，生成吲哚，吲哚与试剂对二甲氨基苯甲醛作用，形成玫瑰吲哚而呈红色。

ONPG试验

实验步骤：将被检菌接种于ONPG生化管肉汤中，于36±1℃培养18-24h，观察结果。溶液变黄色为阳性，不变色为阴性。

沙门氏菌ONPG试验为阴性。    

反应原理：沙门氏菌具有β半乳糖苷酶，可分解邻-硝基β半乳糖苷（ONPG），生成黄色的邻-硝基酚。

赖氨酸脱羧酶试验

实验步骤：将被检菌接种到赖氨酸脱羧酶肉汤和氨基酸脱羧酶对照生化管中，于36±1℃培养18h～24h后，观察结果。赖氨酸脱羧酶肉汤和氨基酸脱羧酶对照均变黄为阴性，赖氨酸脱羧酶肉汤变紫，氨基酸脱羧酶对照变黄为阳性。

沙门氏菌为阳性。

反应原理：当细菌利用碳源丙二酸盐时，可将分解为碳酸钠，使培养基变碱性，使指示剂由绿色变为蓝色。

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