大肠菌群、金黄色葡萄球菌检验中常见问题分析

大肠菌群

大肠菌群：是只一群能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏无芽孢杆菌 。该菌主要来源于人畜粪便。

检测该菌的方法主要有MPN法，平板计数法。

     MPN法中主要用到的是LST、BGLB、EC肉汤等。

     平板计数法主要用DC、VRBA等。

在检测该菌时易出现的问题：

 1、  LST、BGLB、EC等在灭菌时小倒管中气泡排不尽。

 2、气泡不易观察。

 3、VRBA、DC平板上菌落特征不易辨认。 

原因： 

  1、在分装LST、BGLB、EC时，小倒管中有水柱；此外，高压灭菌时，需急排气，灭菌后迅速冷却。

  2、观察气泡时，要对光倾斜试管，使小倒管紧贴在试管壁上，便于观察。

  3、熟悉大肠杆、大肠菌群在上述平板上的特征,必要可做一些阳性的对照。有些食物残渣会影响观察结果，这样需要我们在培养前仔细观察平板的状态，大的食物残渣可以做一些标记。

金黄色葡萄球菌 

金黄色葡萄球菌：是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、败血症等，其毒性的强弱取决于产生的毒素和侵袭性酶，例溶血素酶、杀白细胞素、血浆凝固酶、脱氧核糖核酸酶。

B-P琼脂上金黄色葡萄球菌有黑色的菌落中心，周围有半透明的卵磷脂沉淀环。

甘露醇卵黄琼脂上的特征是菌落黄色，周围也有卵磷脂沉淀环。 

甘露醇高盐琼脂上的菌落特征与甘露醇卵黄琼脂上的菌落特征相同，不过，菌落周围没有卵磷脂沉淀环。

金黄色葡萄球菌在B-P上的菌落特征

检样中常见的问题：

1、平板的状态：透明、有絮状物。

2、凝固酶实验的观察。

原因：

1、不同的厂家的培养基平板制好后的状态有所不同，主要取决于亚碲酸钾卵黄增菌液的不同。我们公司采用的鸡蛋是山鸡蛋，卵磷脂含量较高，因此制备好的平板一般透明度较好，接种金黄色葡萄球菌后，菌落特征较易观察。

2、在添加亚碲酸钾卵黄增菌液时，温度的掌握，不宜太高，过高易使卵黄变性，也不应太低，太低琼脂易凝固。

3、将金黄色葡萄球菌接种到兔血浆上后，每半小时观察一次，观察凝固时，将血浆轻轻倾斜或慢慢倒置，如有流动，既证明没有凝固。如若不明显，可补做DNA酶实验。

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