糖发酵试验

 (一)目的要求
1．了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。
2．掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
(二)基本原理
糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。有些细菌能分解某种糖产生有机酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（如氢气、甲烷、二氧化碳等）；有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。发酵培养基含有蛋白胨，指示剂（溴甲酚紫），倒置的德汉氏小管和不同的糖类。当发酵产酸时，溴甲酚紫指示剂可由紫色（pH6.8）变为黄色(pH5.2)。气体的产生可由倒置的德汉氏试管中有无气泡来证明。如图16—2。
(三)器材
1．菌种   大肠杆菌，普通变形杆菌斜面各一支。
2．培养基   葡萄糖发酵培养基试管和乳糖发酵培养基试管各3支(内装有倒置的德汉氏小试管)。
3．仪器或其他用具   试管架，接种环等。
(四)操作步骤
1．用记号笔在各试管外壁上分别标明发酵培养基名称和所接种的细菌菌名。
2．取葡萄糖发酵培养基试管3支，分别接入大肠杆菌，普通变形杆菌，第三支不接种，作为照。另取乳糖发酵培养基试管3支，同样分别接入大肠杆菌，普通变形杆菌，第三支不接种，作为对照。
在接种后，轻缓摇动试管，使其均匀，防止倒置的小管进入气泡。
3．将接种过和作为对照的6支试管均置37℃培养24~48h。
4．观察各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡。
五、实验报告
1．结果
将结果填入下表。“+”表示产酸或产气，“-”表示不产酸或不产气。
糖类发酵 大肠杆菌 普通变形杆菌 对照
葡萄糖发酵
乳糖发酵      
2．思考题
假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖，发酵试验应该出现什么结果？
  
   

 

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