致泻性大肠埃希氏菌分离、鉴定

分离

增菌后的EC增菌液分别划线接种麦康凯或伊红美蓝琼脂平板

36℃±1℃培养18h-24h

麦康凯：无色至粉红色，光滑、湿润、突出、圆形、边缘整齐

伊红美蓝琼脂：紫红色具黑心，有或无金属光泽，光滑、湿润、圆形、边缘整齐

初步生化

从选择性平板上挑取5-10个菌落分别接种TSI、pH7.2尿素琼脂和营养琼脂小斜面各一管， 36℃±1℃培养18h-24h

TSI斜面产酸或不产酸，底层产酸，硫化氢阴性和尿素阴性的菌株，挑取营养琼脂斜面上生长的菌苔进行生化试验、血清学分型

生化鉴定

氧化酶阴性

靛基质+、甲基红+、V-P-

肠侵袭性大肠杆菌

赖氨酸脱羧酶-

动力试验-（O124动力阳性或阴性）

血清学鉴定

假定试验：挑取经生化试验证实为大肠埃希菌的琼脂培养物，用致病性大肠埃希氏菌、侵袭性大肠埃希氏菌和产肠毒素大肠埃希氏菌多价O 血清和出血性大肠埃希氏菌 O157 血清做玻片凝集试验。当与某一种多价 O 血清凝集时，再与该多价血清所包含的单价O血清做试验。如与某一单价 O 血清呈现强凝集反应，即为假定试验阳性

证实试验：制备 O 抗原悬液，稀释至Mac Farland3 号比浊管相当的浓度。原效价为 1：160～1：320 的 O 血清，用 0.5%盐水稀释至 1：40。稀释血清与抗原悬液在 10 mm×75 mm 试管内等量混合，做单管凝集试验。混匀后放于50℃水浴箱内，经 16 h 后观察结果。如出现凝集，可证实为该 O 抗原 。

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