培养基与培养时间对检测水体中细菌总数的影响

    我们采用4种不同培养基对水体中细菌进行培养，比较不同培养基与不同培养时间对水体中细菌总数检测结果的影响，现报告如下。

1 材料与方法

1．1 培养基：营养琼脂、肉浸汤琼脂、蛋白胨葡萄糖琼脂、857培养基。

1．2 样品来源：1998年1O月随机采取本市便河居民点生活用自来水，便河河水及本院池塘塘水各9份。 

1．3 方法：自来水采样：先将采样点自来水龙头完全开放，放水5分钟后调水流量，常规无菌采集水样500ml，并加入无菌的3％硫代硫酸钠溶液0．5ml以除去残余氯；河水与塘水采样：先将密封状态的无菌采样瓶完全浸入水中后，掀开瓶塞，取样约500ml。按照“GB4789．2—94微生物学部分”进行细菌总数检测。每次以无菌方法分别吸取lml充分混匀的水样于灭菌空平皿中，每份水样各加8个，每2个为1组，随即分别加入15ml灭菌并置45℃预温的营养琼脂、肉浸汤琼脂、蛋白胨葡萄糖琼脂、857琼脂并充分混匀，凝固后，置37~C培养24h、48h、72h、96h并分别记录各培养基中菌落形成单位(CFU)均数。采用秩和检验进行统计学分析。

2 结果

2．1 4种方法培养后CFU均数结果：24h内4种培养基的CFU均数最低，随培养时间延长而增高

2．2 不同时间培养后4种培养基的CFU均数的结果显示：培养48h与72h、72h与96h组间CFU均数差异无显著性；培养24h与48h，24h与72h、24h与96h、48h与96h各组间、CFU均数的差异有高度显著性(P<0．01)。

2．3 4种培养基的CFU均数间两两比较：除营养琼脂培养基与蛋白胨葡萄糖琼脂培养基之间CY'U均数的差异无显著性外，肉浸汤琼脂培养基与营养琼脂培养基、肉浸汤琼脂培养基与蛋白胨葡萄糖琼脂培养基、肉浸汤琼脂培养基与857培养基、营养琼脂培养基与857培养基、蛋白胨葡萄糖琼脂培养基与857培养基、CFU均数的差异均有高度显著性(P<0．01)。

3 讨论

3．1 本组4种培养基接种标本后，l～4天内CFU均数均随培养时间延长而增加，培养24h与48h、72h、96h之间差异显著(P<0．01)；但培养48h与72h、72h与97h组问差异无显著性。本结果显示：虽然培养时间对CF’U数的变化有直接影响，但按“GB4789．2—94微生物部分”方法培养48h报告结果，能准确地检测水体样本的细菌总数。

3．2 按“GB4789．2-_94微生物部分”的方法，检测细菌总数采用营养琼脂培养基。本实验采用包括营养琼脂培养基在内的4种不同培养基进行检测，结果表明，不同培养基之间CFU均数差异显著，且肉浸汤琼脂培养基>营养琼脂培养基>蛋白胨葡萄糖琼脂培养基>857培养基。值得注意的是肉浸汤琼脂培养基与营养琼脂培养基的CY'U均数差异显著，且培养至24h观察结果时，肉浸汤琼脂培养基表面的菌落较大，易辨认，而营养琼脂培养基上菌落较小，需培养48h后计数。这可能与前者用新鲜牛肉浸液配制，而后者用牛肉膏配制有关。因肉浸汤琼脂培养基营养高于营养琼脂培养基，更有利于水体样本中细菌总数的检测。

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