无需高压灭菌的琼脂类培养基的配制方法

  目前培养基的主要灭菌方式有湿热高压灭菌、过滤除菌、加热灭菌等。高压灭菌为最常用的灭菌方式，但也有部分培养基无需高压灭菌，只需煮沸灭菌即可，如VRBA、VRBGA、VRBDA、XLD琼脂、SS琼脂、BS琼脂、DHL琼脂、HE琼脂、XLT4、紫红胆盐琼脂、四号琼脂、庆大霉素琼脂、沙门氏菌显色、O157显色等培养基等。针对此类培养基，特作出如下说明。

  本公司的培养基标签用法中有时会写“称取本品Xg，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中……无需高压灭菌”字样，并未写需要多少度灭菌多少分钟，此时就需要注意不要用高压灭菌锅将培养基进行灭菌，否则就不得不重新配制了。

正确的灭菌方式应为：

1、水浴加热溶解

  使用玻璃容器即可。称取适量干粉培养基加入蒸馏水中，置于沸水浴中，在水浴加热的过程中时常搅拌或摇动培养基使之受热均匀，约25min~30min后可以看到培养基的内部是澄清透亮的，无琼脂粒的存在，此时就可以冷却至所需温度倾注平皿。

2、电磁炉加热溶解

  使用耐电磁炉加热的容器（如搪瓷缸）。称取适量干粉培养基加入蒸馏水中，将搪瓷缸放在电磁炉的中央，打开电磁炉开关，开始加热，用玻璃棒持续搅拌培养基以防底部焦糊，约1-2分钟之后，培养基开始沸腾，产生了大量泡沫状物质并上涌，此时迅速将搪瓷缸拿开（以防飞溅出来），待泡沫消掉之后（约十几秒钟），再将搪瓷缸放上，沸腾起泡沫后再次拿开，如此反复使培养基沸腾4遍即可（如还有明显琼脂粒未溶解，可加沸一次），冷却至所需温度倾注平皿。

3、电炉加热溶解

  使用耐加热的玻璃制品。此方法与方法2的过程一致，使培养基沸腾4遍即可。

注意事项：

1、此方法仅限实验室配制培养基使用。

2、配制量不宜过多，建议配制量在500ml以下，配制的培养基体积建议在容器体积的60%以下。

3、操作时需做好防护，如戴上棉手套，以防不小心烫伤。

4、使用电炉加热时需注意防止玻璃容器受热后碎裂。

5、工业化生产工艺需自行进行摸索。

此方法的最终解释权归青岛高科技工业园海博生物技术有限公司所有。

注：本文属海博生物原创，未经允许不得转载。

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