赖氨酸、精氨酸、鸟氨酸三种脱羧酶培养基用于细菌的脱羧酶、双水解酶试验:取质控菌新鲜培养物分别接种于脱羧酶试验培养基及脱羧酶试验对照培养基,35℃培养24-48小时。对照管应为黄色,试验管呈紫色或紫红色为阳性反应,两管均呈黄色为阴性反应。
氨基酸脱羧酶试验是根据有些细菌能产生某种氨基酸脱羧酶,使该种氨基酸脱去羧基,生成胺(如赖氨酸→尸胺,鸟氨酸→腐胺,精氨酸→精胺),从而使培养基变碱性并通过指示剂变色来观察。
脱羧酶是适应酶或称诱导酶,对底物有特异性,在无相对氨基酸的培养基中不产生此酶,并且需要酸性环境和适宜温度。故在培养基中加入葡萄糖,使细菌发酵葡萄糖产酸,以利于脱羧酶的产生。氨基酸的分解是在厌氧条件下进行,故在培养基表面加液体石蜡。
由于细菌发酵葡萄糖产酸,在培养初期培养基和对照培养基呈黄色,继续培养时,若氨基酸经脱羧或水解产生胺类则培养基变碱,呈紫色或紫红色,即为阳性反应;如至培养末期培养基如同对照管一样呈黄色则判为阴性反应。若为阴性反应,此试验至少应培养4天。
若从培养初期开始至培养末期培养基和对照培养基均呈紫色,则说明该质控菌不能发酵葡萄糖产酸,故而不能产生相应的脱羧酶,因此该质控菌不适用于氨基酸脱羧酶试验。
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