结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）培养基

 结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）培养基为选择性计数固体培养基，主要用于大肠菌群平板计数检验。该培养基的配制及使用方法为：称取本品 41.5g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,煮沸不要超过2 分钟。取适宜稀释度样品液 1ml，加入到无菌平皿中心，将冷至  45℃ ± 0.5℃ 的 VRBA 10-15ml倾注于平皿中。小心旋转平皿将培养基与样液充分混匀。凝固后，再加3-4ml  VRBA 覆盖平板表层 ，翻转平板，置于36 ± 1℃培养 18-24 小时。无需高压灭菌。临用时制备，不得超过3小时。

 VRBA的使用方法与其他培养基的不同之处在于：1、无需高压灭菌，煮沸不超过2分钟，必须现用现配。2、该培养基在倾注第一层凝固之后需要再用VRBA覆盖一层，然后再进行培养。

 为什么每个平板上均要倾倒两次结晶紫中性红胆盐培养基？主要是为了防止表面有迁徙性细菌生长，因为一旦有迁徙性菌落生长蔓延，那这块平板就很难能够清楚的计数了。再倒一次琼脂把可能存在的迁徙性菌落封在琼脂内，让其不能蔓延开来,这样就不会对结果观察造成影响了。所以再次倾倒可以防止菌落蔓延导致无法计数的现象发生。

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