糖发酵试验原理、操作步骤及注意事项

一、实验原理：

各种细菌所含有的分解糖（苷、醇）的酶类不同，对糖（苷、醇）的分解能力各有差异。对某一种糖有的细菌不分解，有的分解后仅产酸，有的分解后既产酸又产气，据此可用以鉴别细菌。

二、试剂与器材：

1、菌种：大肠埃希氏菌、伤寒沙门氏菌。

2、培养基：葡萄糖和乳糖发酵管。

三、操作步骤：

将大肠埃希氏菌和伤寒沙门氏菌分别接种于葡萄糖、乳糖发酵管内，35℃培养18h~24h观察结果。

四、试验结果：

观察结果时，首先确定细菌是否生长，若细菌生长则培养基浑浊，然后再观察细菌对糖类分解的结果：

（1）不分解糖：培养基颜色与接种前相比无变化，记录时以“-”表示；

（2）分解糖只产酸不产气：培养基中的指示剂（溴甲酚紫）由紫色变为黄色，液体培养基中的倒管未发现气泡；若为半固体培养基，则培养基内未见气泡或琼脂断裂，记录时以“+”表示；

（3）分解糖既产酸又产气：除培养基中的指示剂颜色改变外，液体培养基中的倒管见有气泡；若为半固体培养基，则培养基内出现气泡或琼脂断裂，记录时以“”表示。

本试验大肠埃希氏菌分解葡萄糖和乳糖产酸又产气“”，伤寒沙门氏菌分解葡萄糖只产酸不产气“+”，不分解乳糖“-”。

五、注意事项：

配制糖发酵管时内装的小倒管在接种细菌前应是无气泡存在的，否则不宜接种细菌。

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