用途:用于肠球菌的快速选择性分离培养和计数。
原理:胰酪蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;细菌水解七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素;柠檬酸钠、牛胆粉和叠氮化钠为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。
操作步骤:
使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。
1、制备质控菌液。
2、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于待测平板和参比平板上,每一稀释度接种两个平板。
3、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在待测平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。
4、35±2℃倒置培养基培养24±2小时,记录实验结果。
微生物试验:
接种以下质控菌株,35±2℃倒置培养基培养24±2小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
G≤1 |
/ |
|
粪肠球菌 |
ATCC29212 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
褐色菌落,菌落周围变黑 |
肠球菌 |
CMCC(B)27270 |
20-200 |
PR≥0.5 |
褐色菌落,菌落周围变黑 |
图1 肠球菌琼脂微生物质控结果
备注:a: 大肠埃希氏菌,b: 金黄色葡萄球菌,c:粪肠球菌,d:肠球菌
方法的局限性
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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