VP试验的试验原理、操作步骤及注意事项

一、实验原理：

某些细菌分解葡萄糖生成丙酮酸，丙酮酸可进一步脱羧生成乙酰甲基甲醇，乙酰甲基甲醇在碱性环境下被氧化成为二乙酰，后者与蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用，生成红色的胍缩二乙酰而呈现红色，为VP试验阳性。若培养基中胍基含量少，可加入少量含胍基的化合物如肌酸肌酐等（本试验加入α萘酚）可以加速其反应。

二、试剂与器材：

1、菌种：大肠埃希氏菌、产气肠杆菌。

2、培养基：葡萄糖蛋白胨水。

3、试剂：VP试液甲液（6%α萘酚酒精溶液）和乙液（40%KOH溶液）

三、操作步骤：

Barritt法：将大肠埃希氏菌和产气肠杆菌分别接种于葡萄糖蛋白胨水中，35℃培养24h~48h，于培养物中先加入VP试液甲液（6%α萘酚酒精溶液）6滴，摇匀，再加入乙液（40%KOH溶液）2滴，摇匀，观察结果。

四、试验结果：

如立即于数分钟内出现红色反应者为阳性；若不出现红色反应，可将试管置35℃孵育4h后再行观察，仍无红色出现者为阴性。本试验大肠埃希氏菌为阴性、产气肠杆菌为阳性。

五、注意事项：

滴加VP试剂甲液和乙液后需摇匀，静置10min后才能看到红色化合物出现。

上一篇：影响培养基灭菌效果的因素

下一篇：不同需氧量微生物的培养原理及方法