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乳糖蛋白胨培养液的应用原理及注意事项

于跃
录入时间:2017-4-21 14:52:40 来源:青岛海博生物

乳糖蛋白胨培养液是国标规定的用于水源水中总大肠菌群的测定的培养基。配成的乳糖蛋白胨培养液呈澄清透明的紫色(下图左一),它适用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定。下面我们来介绍一下乳糖蛋白胨培养基的应用原理和注意事项。

基本原理

乳糖蛋白胨培养基里富含蛋白胨,其主要作用即为给菌株提供必需的氮源矿物质乳糖成分是为大肠菌群的发酵提供可发酵糖类氯化钠的添加量为5%,主要是为了维持渗透压的平衡溴甲酚紫pH指示剂,酸性呈黄色,碱性呈紫色。因此,能够发酵产酸的细菌的培养液变黄,如果并有产气者则可在小倒管里看到明显的气泡;反之,不产酸的细菌培养后液体呈紫色,不产气的在小倒管里收集不到气体

例如:大肠杆菌(下图右一)能够发酵培养基中的乳糖产酸并产气,因此发酵后液体变小倒管含有气体,轻摇发酵管也会有小气泡上浮。

再如:鼠伤寒沙门氏菌(下图中间)不产酸不产气,因此发酵后发酵管底部有沉淀但是液体颜色仍为紫色并无气体

 

试验注意事项

1、本品中需要115℃下高压灭菌20min,这区别大多数培养基121℃高压灭菌15min的灭菌条件。这是因为,本品中含有乳糖,121℃灭菌会使乳糖降解,碳化。

2、试验对于接种量要求10-100CfU,若接种量过高,培养液应加倍成分。这是由于样品的量大的情况下,培养液稀释大,各种成分的相对浓度就会不足,就不能满足细菌的生长要求,存在实验失败的概率。因此,合理调整样品量和营养液浓度的比例需要反复实验和多组对照。

常见问题

1、 配方中的乳糖可否用葡萄糖代替?

答:不能。因为葡萄糖经细菌发酵产酸过多会使pH达到4.5,易导致大肠杆菌死亡。

2、 水源水中总大肠菌群的测定能否用其它培养基代替乳糖蛋白胨培养液?

答:不建议。这是因为饮用水中杂菌较少,而一些大肠菌群检验培养基中经常使用胆盐.洗衣粉、十二烷基硫酸钠.煌绿、龙胆紫,孔雀绿等抑菌剂。抑菌剂可抑制样品中的一些杂菌,而有利于大肠菌群的生长和挑选,但对大肠菌群中的某些菌株有时也产生一些抑制作用。

 

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