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克氏双糖铁复合试验的试验原理及操作步骤

郝倩倩
录入时间:2017-9-8 8:58:44 来源:青岛海博生物

一、实验原理:

    该培养基用酚红作指示剂,在酸性时呈红色。细菌如能发酵乳糖和葡萄糖而产酸产气,则斜面与底层呈黄色,且有气泡。如只发酵葡萄糖不发酵乳糖,因培养基中葡萄糖含量较少(占乳糖量的十分之一),斜面所生成的少量酸可因接触空气被氧化挥发,因而斜面部分保持原来的红色;底层由于是在相对缺氧状态下,细菌发酵葡萄糖所生成的酸类物质不被氧化挥发而保持黄色。如细菌分解蛋白质产生硫化氢,则与Fe2+作用生成黑色的FeS,培养基变黑。

二、试剂与器材:

    1、菌种:乙型副伤寒沙门氏菌。

    2、培养基:克氏双糖铁培养基。

三、操作步骤:

    将乙型副伤寒沙门氏菌接种于克氏双糖铁培养基(底层穿刺,上层斜面划线),35℃培养24h。

四、试验结果:

    细菌发酵乳糖和葡萄糖产酸产气,则斜面与底层均呈黄色,且有气泡产生。若细菌只发酵葡萄糖而不发酵乳糖,则斜面为红色,底层为黄色。如底层变黑,说明该菌能产生硫化氢,生成黑色的FeS沉淀。

 

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