克氏双糖铁复合试验的试验原理及操作步骤

一、实验原理：

    该培养基用酚红作指示剂，在酸性时呈红色。细菌如能发酵乳糖和葡萄糖而产酸产气，则斜面与底层呈黄色，且有气泡。如只发酵葡萄糖不发酵乳糖，因培养基中葡萄糖含量较少（占乳糖量的十分之一），斜面所生成的少量酸可因接触空气被氧化挥发，因而斜面部分保持原来的红色；底层由于是在相对缺氧状态下，细菌发酵葡萄糖所生成的酸类物质不被氧化挥发而保持黄色。如细菌分解蛋白质产生硫化氢，则与Fe2+作用生成黑色的FeS，培养基变黑。

二、试剂与器材：

    1、菌种：乙型副伤寒沙门氏菌。

    2、培养基：克氏双糖铁培养基。

三、操作步骤：

    将乙型副伤寒沙门氏菌接种于克氏双糖铁培养基（底层穿刺，上层斜面划线），35℃培养24h。

四、试验结果：

    细菌发酵乳糖和葡萄糖产酸产气，则斜面与底层均呈黄色，且有气泡产生。若细菌只发酵葡萄糖而不发酵乳糖，则斜面为红色，底层为黄色。如底层变黑，说明该菌能产生硫化氢，生成黑色的FeS沉淀。

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