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细菌生化试验—赖氨酸铁琼脂试验

张辉
录入时间:2018-3-23 9:14:41 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

赖氨酸铁琼脂培养基中,蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵的糖类;溴甲酚紫为pH指示剂;琼脂作为凝固剂。

培养基用于同时检测肠杆菌科细菌的赖氨酸脱羧酶和产硫化氢试验特别用于检测沙门氏菌和亚利桑那菌。

二、培养基

 蛋白胨   5.0 g
 酵母浸膏   3.0 g
 葡萄糖   1.0 g
 盐酸L-赖氨酸   10.0 g
 硫代硫酸钠   0.04 g
 柠檬酸铁铵    0.5 g
 溴甲酚紫   0.02 g
 琼脂   15.0 g
    1000.0 mL

 

以上各成分(溴甲酚紫除外)加热溶化于水中,调至pH 6.7 ± 0.2,加入溴甲酚紫,混合均匀,分装于100*13mm小试管中,每管4mL116℃灭菌15min,制成深底层短斜面(斜面长2.5cm底部长4cm),凝固备用。本培养基可再添加精氨酸10.0 g,即制成赖氨酸精氨酸铁琼脂斜面,用于耶尔森氏菌的鉴别。

三、试验方法

以接种针挑取纯培养物或菌落穿刺接种达管底,并涂划于斜面,于36±1℃培养18-24h,观察试验结果。

四、试验结果判断:

质控菌株

菌株编号

生长情况

质控结果

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC 14028

+++

斜面紫色,底层紫色,产硫化氢

亚利桑那沙门氏菌

CMCC(B) 47001

+++

斜面紫色,底层紫色,产硫化氢

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

+++

斜面紫色,底层紫色,不产硫化氢

五、说明:

若与三糖铁琼脂培养基联合使用,在初步生化鉴定中会有很大助益。

 

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