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TTC营养琼脂的原理及实验现象

王娟 
录入时间:2018-3-27 10:36:21 来源:青岛海博生物

    用途:用于菌落总数测定(GB/T4789.9-2003和GB/T4789.28-2003)。

    原理:蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;大多数细菌能还原TTC,使之形成易于辨别的红色菌落,TTC还能减缓某些细菌的蔓延生长。

    操作步骤:

   使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。

    1、制备质控菌液。

    2、选择合适稀释度的目标菌质控菌液1ml,接种到两个无菌平皿中,将10ml-15ml冷至45-50℃的TTC营养琼脂倾注于每个平皿中。小心旋转平皿,将培养基和目标菌质控菌液充分混匀。待琼脂凝固后,再加入3ml-4ml的TTC营养琼脂覆盖平板表层,以TSA为参比培养基。

    3、36±1℃倒置培养基培养48±2小时,记录实验结果。

    微生物试验:

    接种以下质控菌株,36±1℃倒置培养基培养48±2小时: 

 质控菌株

 菌株编号

 接种量(CFU)

 参比或计数

培养基

 方法

质控评定标准

其他特征

 金黄色葡萄球菌

 ATCC25923

 20-200

TSA

 定量

PR0.7

淡红色菌落

 大肠埃希氏菌

 ATCC25922

 20-200

 PR0.7

淡红色菌落

 伤寒沙门氏菌

 ATCC14028

 20-200

 PR0.7

淡红色菌落

 铜绿假单胞菌

 CMCC27853

 20-200

 PR0.7

淡红色菌落

 

 

图1-2  TTC营养琼脂微生物质控结果

备注:a:金黄色葡萄球菌,b:大肠埃希氏菌,c:伤寒沙门氏菌,d: 铜绿假单胞菌


    方法的局限性

    本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

 

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