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赖氨酸铁琼脂(LIA)原理及现象

纪旭艳
录入时间:2018-4-4 10:02:17 来源:青岛海博生物

一、用途

  用于同时检测肠杆菌科细菌的赖氨酸脱羧酶和产硫化氢试验,特别用于检测沙门氏菌和亚利桑那菌

二、成分(g/L)及原理

    蛋白胨............................5.0
    葡萄糖............................1.0
    酵母浸粉..........................3.0
    L-赖氨酸盐酸盐....................10.0
    硫代硫酸钠........................0.04
    柠檬酸铁铵........................0.5
    溴甲酚紫..........................0.02
    琼脂..............................12.5
    pH6.7±0.2 at 25℃

  培养基中的蛋白胨和酵母浸粉提供基本营养物质,葡萄糖为唯一可发酵碳源,硫代硫酸钠可用于检测硫化氢的生成,溴甲酚紫为酸碱指示剂。若细菌仅能发酵葡萄糖,则产酸使培养基变黄,斜面由于产酸较少被氧化生成碱性物质,底层不被氧化,因此斜面显紫色底层显黄色。有些细菌具有赖氨酸脱羧酶,使赖氨酸脱羧产碱,底层又变成紫色。有些细菌可还原硫代硫酸钠产生硫化氢,并与柠檬酸铁铵反应生成黑色沉淀。

三、与三糖铁琼脂(TSI)对比

  三糖铁琼脂(TSI)和赖氨酸铁琼脂(LIA)均用于沙门氏菌的检测。TSI中除葡萄糖,还含有乳糖和蔗糖,绝大多数沙门氏菌不发酵乳糖和蔗糖,产硫化氢,因而在TSI上呈斜面红色,底层黄色,有黑色沉淀。而亚利桑那沙门氏菌中部分菌株可以发酵乳糖,在TSI上呈现出斜面黄色,底层黄色,产硫化氢,这一现象与普通变形杆菌相同(普通变形杆菌发酵蔗糖不发酵乳糖,产硫化氢)。奇异变形杆菌(发酵葡萄糖,不发酵乳糖和蔗糖,产硫化氢)在TSI上呈斜面红色,底层黄色,并有黑色沉淀,与多数沙门氏菌现象一致。因此,在TSI上很难将变形杆菌与沙门氏菌区分开。在LIA上,多数沙门氏菌(包括亚利桑那沙门氏菌)由于赖氨酸脱羧酶阳性,产硫化氢,因而表现出斜面紫色、底层紫色,底层有黑色沉淀。而变形杆菌不能将赖氨酸脱羧产碱,因而表现出斜面紫色,底层黄色,底层有黑色沉淀。与TSI相比,LIA能将沙门氏菌与变形杆菌区分开来,特别是有利于亚利桑那沙门氏菌的检测。

 

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